心肌注射骨髓間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞后逃逸細(xì)胞對心肌梗死大鼠模型心外臟器的影響.pdf

1、目的：
　　 移植骨髓來源的間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞(Mesenchymal stromal cells，MSCs)已成為心肌梗死治療的新熱點。心肌注射已經(jīng)成為細(xì)胞精確輸注至目標(biāo)區(qū)心肌的最有效的途徑。然而，經(jīng)心肌注射細(xì)胞治療心肌梗死后會發(fā)生細(xì)胞逃逸，逃逸的細(xì)胞隨之會被心外臟器特別是體循環(huán)和肺循環(huán)的過濾器官所截留。我們設(shè)計此試驗來探索遷移的骨髓來源的間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞的體內(nèi)分布、最終命運以及其對肺臟、肝臟和脾臟的影響。
　　 方法：

2、r>　　 MSCs取自雄性Lewis大鼠，冠狀動脈結(jié)扎法制作雌性Lewis大鼠心肌梗死(Myocardialinfarction，MI)模型。心梗3周后，經(jīng)超聲篩選左室射血分?jǐn)?shù)小于60％同時左室縮短分?jǐn)?shù)小于30％的心肌梗死大鼠被隨機(jī)分兩組，細(xì)胞移植組(n=22)于心梗邊緣區(qū)單點注射5-溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)標(biāo)記的雄性MSCs3×106個/50μl；對照組(n=21)注射相同體積的磷酸鹽緩沖液(PBS)。10只健康大鼠作為假手術(shù)組

3、只接受心肌內(nèi)注射相同體積的PBS。MSCs移植后4周，超聲心動圖評價左心功能，采血測定肝功能、血常規(guī)及免疫球蛋白M水平，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)及比色法分別測定肺組織中腫瘤壞死因子-α(Tumournecrosisfactor-α，TNF-α)，白細(xì)胞介素-1(interleukin-1β，IL-1β)含量及髓過氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)活性，應(yīng)用實時定量聚合酶鏈反應(yīng)來測定各臟器中的細(xì)胞存留(realti

4、me-polymerasechainreaction，qRT-PCR)，免疫組織化學(xué)雙染法檢測移植細(xì)胞及其分化。
　　 結(jié)果：
　　 細(xì)胞移植后心功能得到改善。qRT-PCR結(jié)果顯示移植細(xì)胞在心臟中存留數(shù)量最多，其次依次為脾臟、肝臟和肺臟。肝功能、脾功能及組織勻漿檢測均未發(fā)現(xiàn)細(xì)胞移植造成了明顯的副反應(yīng)。相反，細(xì)胞移植組大鼠血清白蛋白水平明顯升高，谷丙轉(zhuǎn)氨酶水平明顯下降，提示細(xì)胞移植在一定程度上改善了心梗大鼠的肝臟功能。移