以脂質(zhì)體納米顆粒為載體的miR-100及miR-145在4T1細胞中表達的研究.pdf

1、microRNA(miRNA)可以通過和目的基因mRNA的3’UTR端不完全互補結合而抑制目的基因的表達，miR在調(diào)節(jié)細胞周期、增殖、分化及粘附性等方面發(fā)揮著重要的作用。已有文獻報道m(xù)iR-100在多種腫瘤中表達下調(diào)；我們前期工作亦提示miR-100在乳腺癌患者血清中表達下降。此外，miR-145可以調(diào)控一系列致癌基因的表達，已有相關研究報道恢復miR-145在乳腺癌細胞系的表達可以誘導腫瘤細胞凋亡壞死、抑制腫瘤細胞的增殖及浸潤能力。m

2、iR在腫瘤的治療方面有良好的應用前景，但目前尚缺乏安全、高效、緩釋、特異性強的體內(nèi)轉染miR的方法?；诖藛栴}，本項目旨在通過化學合成研制一種新型的脂質(zhì)體納米顆粒(lipo-NPs)轉染系統(tǒng)，可以在體外、體內(nèi)高效轉運有抑癌作用的miR，最終達到治療腫瘤的目的。本論文則重點討論、驗證lipo-NPs在體外的轉染效果，miR選取有潛在抑制乳腺癌生長作用的miR-100和有明確抑癌作用的miR-145。本實驗對制備的lipo-NPs的理化性質(zhì)

3、、轉染miRs的效率及其生物學功能進行了探索。
　　 結果提示，lipo-NPs粒徑均一，形態(tài)穩(wěn)定，可以穿透細胞膜進入細胞，并將Cy3-siRNA轉運到細胞胞漿中。DOTAP和核酸的最佳摩爾比為40:1，此時lipo-NPs的轉染效率高于陽性對照組lipofectamine-2000。隨后，我們證實經(jīng)lipo-NPs轉染miR-100-mimics及miR-145-mimics后miR-100/miR-145在細胞中的表達顯著上