丙戊酸對口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞CAL-27生物學(xué)行為的影響.pdf

1、目的:
　　口腔鱗狀細(xì)胞癌是口腔頜面部常見的惡性腫瘤之一，其治療主要采取以手術(shù)、放療、化療、生物治療等為主的綜合序列治療方法。但近二十年來，口腔惡性腫瘤患者的五年生存率仍然維持在50％左右。晚期患者的生存率更低。根據(jù)口腔鱗狀細(xì)胞癌的發(fā)生和發(fā)展的機(jī)理，發(fā)現(xiàn)或者發(fā)明新的治療方法或治療藥物十分迫切。組蛋白去乙?；?HDAC)與組蛋白乙?；竸?dòng)態(tài)調(diào)控組蛋白與DNA的親和性而調(diào)節(jié)染色質(zhì)的狀態(tài)，從而調(diào)控基因表達(dá)。目前研究發(fā)現(xiàn)多種腫瘤的發(fā)生發(fā)

2、展與HDAC的調(diào)控異常有關(guān)。丙戊酸是一種經(jīng)典的抗癲癇藥物，近年來因?yàn)楸话l(fā)現(xiàn)可以抑制HDAC，從而影響腫瘤的生物學(xué)行為如增殖、凋亡、生長周期、分化等，可能成為一種新型的抗腫瘤藥物而倍受矚目。但是丙戊酸對口腔腫瘤的作用研究較少，其中的作用機(jī)制尚不清楚，本文主要研究其對口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系CAL-27生物學(xué)行為的影響以及可能的作用機(jī)制進(jìn)行探討。
　　方法:
　　1.相差顯微鏡下，觀察不同丙戊酸對CAL-27細(xì)胞形態(tài)的影響。

3、　　2.甲基噻唑基四唑鹽比色法，觀察丙戊酸對CAL-27細(xì)胞的毒性和生長抑制情況。
　　3.流式細(xì)胞技術(shù)檢測丙戊酸對CAL-27細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期的影響。
　　4.熒光定量PCR法檢測在丙戊酸誘導(dǎo)CAL-27分化和凋亡過程中，小泛素樣修飾物(SUMO)相關(guān)基因的mRNA變化。
　　結(jié)果:
　　1.隨著丙戊酸濃度的升高，丙戊酸對CAL-27的生長抑制逐漸增加，細(xì)胞凋亡率亦逐漸增加，在濃度為2mM時(shí)，影響最為顯著。丙

4、戊酸作用于CAL-27后，細(xì)胞周期發(fā)生阻滯，G1期增加，S期減少，G2期無明顯變化。
　　2.丙戊酸作用于CAL-27細(xì)胞24小時(shí)后，分化指標(biāo)外皮蛋白mRNA轉(zhuǎn)錄水平明顯增加，細(xì)胞分化。
　　3.在丙戊酸誘導(dǎo)CAL-27細(xì)胞凋亡和分化過程中，小泛素樣修飾物的部分相關(guān)基因發(fā)生改變，其中SENP1表達(dá)下調(diào)，SENP3、SUMO1、SUMO2表達(dá)上調(diào)。
　　結(jié)論:
　　1.丙戊酸可以抑制口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞系CAL-27