內(nèi)皮素-1(1-31)大鼠側(cè)腦室和孤束核中樞心血管作用機制研究.pdf

1、目的：
　　心血管疾病又稱為循環(huán)系統(tǒng)疾病，是危害人類健康的全球性公共疾病。這些疾病都有著相似的發(fā)病過程、病因及治療方法。其中高血壓是心血管疾病最常見病種之一，最近幾年在我國發(fā)病年齡呈年輕化趨勢，資料顯示，我國6-18歲的中小學(xué)生中，高血壓的發(fā)病率就已達8％。目前普遍認為高血壓是一種基因相關(guān)、多因素作用、多階段發(fā)展的疾病，其發(fā)生和發(fā)展的內(nèi)在確切機制仍未完全闡明。高血壓的死亡原因主要取決于它的并發(fā)癥，如腦血管意外、尿毒癥、充血性心力衰

2、竭等，在我國74%的高血壓病死于腦循環(huán)障礙。多項研究證實，內(nèi)皮素(endothelin，ET)在心血管功能的調(diào)節(jié)中扮演著重要角色，是一種內(nèi)源性長效血管收縮調(diào)節(jié)因子，可能參與高血壓等心血管疾病的發(fā)病過程。ET-1(1-21)在人及嚙齒類動物體內(nèi)中樞均有分布，且縮血管功能強大，而且可能通過中樞的機制參與心血管活動的調(diào)節(jié)。1997年發(fā)現(xiàn)的ET-1(1-31)也具有類似的外周心血管調(diào)節(jié)作用，但其在中樞尤其在孤束核的心血管作用尚不清楚。因此，本課

3、題通過研究ET-1(1-31)在大鼠側(cè)腦室和孤束核中的心血管效應(yīng)，探討其作用機制，為研究高血壓的發(fā)病機制和發(fā)現(xiàn)新型治療高血壓藥物的作用靶點提供一定的理論依據(jù)和實驗參考。
　　方法：
　　研究ET-1(1-31)在大鼠側(cè)腦室的心血管效應(yīng)：實驗選用SPF級健康雄性SD大鼠67只，體重300~350g，隨機分為以下四組：1.對照組：以人工腦脊液(Artificialcerebrospinalfluid，aCSF)為對照組，觀察側(cè)腦

4、室注射ET-1(1-31)(500pmol,n=4)、ET-1(1-21)(25pmol,n=7)、大內(nèi)皮素(Bigendothelin,BigET-1)(500pmol,n=5)和aCSF(5μl,n=5)對大鼠心率和平均動脈壓(meanarterialpressure，MAP)的作用。2.外周阻斷劑處理組：酚妥拉明和普萘洛爾預(yù)處理后，ET-1(1-31)對大鼠產(chǎn)生的升血壓作用。3.PRD組：內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶抑制劑膦酰二肽（phospho

5、ramidon，PRD）預(yù)處理對ET-1(1-31)、ET-1(1-21)和BigET-1的中樞心血管作用。4.內(nèi)皮素受體拮抗劑組：內(nèi)皮素受體拮抗劑預(yù)處理對ET-1(1-31)和ET-1(1-21)的中樞心血管作用。
　　研究ET-1(1-31)在大鼠孤束核的心血管效應(yīng)：實驗選用SPF級健康雄性SD大鼠90只，體重300~350g，其中50只大鼠單純給藥，11只大鼠為BRS組，其余29只為預(yù)先給予阻斷劑組。隨機分為對照組（aCSF

6、，n=8）、ET-1(1-31)低劑量組（0.5pmol，n=14）、ET-1(1-31)中劑量組（1.0pmol，n=14）、ET-1(1-31)高劑量組（2.0pmol，n=14）：1.雙側(cè)NTS注射組：以aCSF為對照，在大鼠雙側(cè)NTS微量注射不同濃度的ET-1(1-31)(0.5~2.0pmol)，觀察其對血壓和心率的影響。2.單側(cè)NTS注射組：在大鼠NTS單側(cè)微量注射不同濃度ET-1(1-31)(0.5~2.0pmol)，觀察

7、其對血壓和心率的影響。3.動脈壓力反射功能（Baroreflexsensitivity,BRS）組：以aCSF為對照組，NTS雙側(cè)微量注射ET-1(1-31)(1.0pmol)，觀察其對BRS的影響。4.受體拮抗劑組：大鼠預(yù)先分別給予ETA拮抗劑BQ123處理，ETB拮抗劑BQ788處理，然后分別在大鼠NTS單側(cè)微量注射ET-1(1-31)，探討NTS內(nèi)ET-1(1-31)的心血管效應(yīng)機制。5.非特異性受體拮抗劑組：大鼠預(yù)先分別給予非特

8、異性谷氨酸受體拮抗劑KYN預(yù)處理，然后分別在NTS單側(cè)微量注射ET-1(1-31)，探討NTS內(nèi)ET-1(1-31)產(chǎn)生的心血管效應(yīng)機制。
　　結(jié)果：
　　ET-1(1-31)大鼠側(cè)腦室微量注射實驗結(jié)果顯示ET-1(1-31)和BigET-1產(chǎn)生的中樞降壓效應(yīng)相似(P>0.05)，ET-1(1-21)的中樞心血管效應(yīng)較之ET-1(1-31)和BigET-1高(P<0.05)；大鼠側(cè)腦室注射ET-1(1-31)引起的升血壓作用

9、可能主要通過增加外周兒茶酚釋放，激動α-腎上腺素受體而產(chǎn)生血管收縮作用，而與β-腎上腺素受體沒有關(guān)系；內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶抑制劑膦酰二肽（phosphoramidon，PRD）預(yù)處理可以完全抑制ET-1(1-31)和BigET-1在側(cè)腦室產(chǎn)生的心血管效應(yīng)(P<0.05)，而不影響ET-1(1-21)的中樞心血管作用；內(nèi)皮素受體拮抗劑BQ123預(yù)處理可以完全阻斷大鼠側(cè)腦室注射ET-1(1-31)產(chǎn)生的心血管作用(P<0.05)，并且可以削弱ET-

10、1(1-21)產(chǎn)生的中樞心血管效應(yīng)，內(nèi)皮素受體拮抗劑BQ788對大鼠側(cè)腦室注射ET-1(1-31)和ET-1(1-21)產(chǎn)生的心血管作用沒有影響(P>0.05)。
　　ET-1(1-31)大鼠孤束核微量注射實驗結(jié)果顯示在麻醉大鼠單側(cè)NTS微量注射ET-1(1-31)對大鼠血壓和心率產(chǎn)生劑量依賴性的降低血壓和減緩心率效應(yīng)，雙側(cè)注射ET-1(1-31)產(chǎn)生類似的降低血壓、減緩心率效應(yīng)，但持續(xù)時間較雙側(cè)短(P<0.05)；NTS微注射E

11、T-1(1-31)能夠時間依賴性地降低大鼠BRS，在給藥后即可顯著性地降低大鼠的BRS(P<0.05)；單側(cè)NTS注射ETA受體拮抗劑BQ123不影響大鼠基礎(chǔ)血壓和心率，但顯著影響ET-1(1-31)在NTS產(chǎn)生的降低血壓和減緩心率的作用(P<0.05)，單側(cè)NTS注射ETB受體拮抗劑BQ788不影響大鼠基礎(chǔ)血壓和心率，對ET-1(1-31)在NTS產(chǎn)生的降低血壓和減緩心率作用也基本沒有影響(P>0.05)；非特異性谷氨酸受體拮抗劑KY

12、N預(yù)處理能夠顯著減弱ET-1(1-31)在NTS產(chǎn)生的降低血壓和減緩心率的效應(yīng)(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　本研究顯示大鼠側(cè)腦室注射ET-1(1-31)產(chǎn)生與bigET-1和ET-1(1-21)類似的中樞心血管效應(yīng)，且ET-1(1-31)的心血管效應(yīng)與bigET-1類似，均比ET-1(1-21)弱，ET-1(1-31)的中樞心血管效應(yīng)是由ETA受體介導(dǎo)產(chǎn)生的間接作用；受體干預(yù)處理大鼠NTS微量注射ET-1(1-31)產(chǎn)