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1、目的:探討氯化鈷誘導(dǎo)的低氧環(huán)境下骨髓增生異常綜合征細(xì)胞株MUTZ-1 HIF-1α及VEGF的表達(dá)情況,進(jìn)而探討其在骨髓增生異常綜合征血管新生中的作用。低氧環(huán)境下,不同濃度沙利度胺對(duì)骨髓增生異常綜合征細(xì)胞株MUTZ-1 HIF-1α、VEGF表達(dá)情況,探索其在骨髓增生異常綜合征治療中可能機(jī)制。
方法:(1)將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MUTZ-1細(xì)胞分別給予不同濃度氯化鈷處理4h、8h、12h、24h,用MTT法檢測(cè)缺氧對(duì)細(xì)胞增殖的影響
2、。
(2)運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)不同濃度氯化鈷誘導(dǎo)MUTZ-1細(xì)胞缺氧不同時(shí)間HIF-1α、VEGF基因表達(dá)情況。
(3)將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的MUTZ-1細(xì)胞給予氯化鈷處理誘導(dǎo)缺氧后,予以不同濃度沙利度胺處理24h后,用MTT法檢測(cè)缺氧狀態(tài)下,沙利度胺對(duì)細(xì)胞增殖的影響。
(4)運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)氯化鈷誘導(dǎo)MUTZ-1細(xì)胞缺氧環(huán)境下,不同濃度沙利度胺作用24h后HIF-1α、VEGF基因表達(dá)情況。<
3、br> 結(jié)果:(1)不同濃度氯化鈷對(duì)MUTZ-1細(xì)胞影響不同,50μmmol/L氯化鈷對(duì)細(xì)胞影響最小,隨著濃度增加,抑制作用增強(qiáng),各組之間均有顯著的差異(P<0.05)。隨著作用時(shí)間延長(zhǎng),細(xì)胞存活率無(wú)明顯改變。
(2)不同濃度氯化鈷誘導(dǎo)缺氧下HIF-1α、VEGF mRNA表達(dá)均比常氧下表達(dá)高,并具有顯著差異(P<0.05)。同一濃度不同時(shí)間HIF-1α、VEGF mRNA表達(dá)無(wú)明顯差異(P>0.05)。100μmol/L氯
4、化鈷組HIF-1α、VEGF mRNA表達(dá)均比50μmol/L氯化鈷、150μmol/L氯化鈷表達(dá)高。
(3)缺氧下,沙利度胺可明顯抑制細(xì)胞增殖,隨給藥濃度增加,細(xì)胞存活率逐漸降低,各組之間均有顯著差異(P<0.05)。
(4)低氧環(huán)境下,不同濃度沙利度胺組HIF-1α、VEGF mRNA表達(dá)均比對(duì)照組表達(dá)明顯降低,隨著濃度增加,表達(dá)逐漸降低,各組之間均有顯著的差異(P<0.05)。
結(jié)論:(1)氯化鈷模擬
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