兔角膜板層移植去端肽豬皮Ⅰ型膠原的實驗研究.pdf

1、目的：
　　 1.研制一種擁有良好光學透明度、角膜曲率與一定力學強度的角膜移植替代物,并評價其性能。
　　 2.觀察去端肽豬皮Ⅰ型膠原行板層角膜移植術后的角膜愈合情況,并分析相關影響因素。
　　 3.探討去端肽豬皮Ⅰ型膠原作為角膜移植替代物的可行性,為進一步研制更成熟的角膜移植替代材料提供理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 中國純種大耳白兔100只,從中隨機選取80只兔(80眼)為實驗組,根據(jù)角膜移植

2、植片的來源不同將實驗組隨機分為膠原材料實驗組(A組,40眼)及同種異體對照組(B組,40眼),兩組均行單眼的前板層角膜移植術。余20只兔(40眼)作為B組角膜移植供體來源,實驗組80只兔未手術眼作為空白對照組(N組)。各組術后每天行大體、裂隙燈觀察,4周后每月觀察一次,觀察角膜愈合情況,角膜是否透明、植片是否脫落、有無新生血管長入,并按評分標準記錄評分。A、B組于術后3天、14天、1個月、3個月和6個月處死動物,每時間點8只(8眼),取

3、兔角膜行組織病理學觀察,觀察角膜上皮層及基質層的修復情況；免疫組織化學染色檢測上皮細胞標志蛋白K3抗體AE5的表達,以鑒定角膜上皮的愈合情況。
　　 結果
　　 1.去端肽豬皮Ⅰ型膠原性能:膠原材料的白光透過率可達91±2％,折光指數(shù)1.3520±0.0002,接近人角膜基質折光指數(shù)(1.373-1.380),抗張強度285±14KPa,彈性模量為1.7±0.2MPa,斷裂伸長率16±3％,擁有一個良好的光學性能與角膜曲

4、率,有一定的抗張強度。
　　 2.大體觀察:術后A、B兩組板層移植術后角膜透明度評分均逐漸降低,即角膜的透明度逐漸升高,術后6個月透明度最高。A組在3天、7天及14天角膜透明度評分較B組差別有統(tǒng)計學意義(P<0.05),說明在移植術后仞期膠原材料相對于同種異體植片可能不能使角膜達到一個良好的透明度；術后1月、3月及6月時間點A組與B組角膜透明度比較,差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05),說明膠原材料與同種異體植片在術后角膜透明度恢復

5、上可能達到同樣的效果。A、B兩組術后角膜新生血管評分逐漸升高,術后14天最高,后B組逐漸減輕,但A組變化緩慢,術后1個月新生血管程度逐漸減輕。6個月時,兩組對角膜新生血管的影響可能不同,A組術后后期角膜新生血管可能不能完全消失。
　　 3.組織病理學:A組術后3天,角膜中央均勻紅染的膠原物質覆蓋表面,邊緣可見上皮細胞向其表面爬行；術后1月,上皮基本修復,無明顯的膠原材料；術后6月,角膜上皮表面光滑,上皮細胞排列規(guī)則,淺基質層膠原

6、纖維排列艦則,部分角膜存在小的膠原紊亂區(qū)域。B組術后3天,角膜上皮基本完整,局部偶有小的缺損；術后1月,角膜上皮基本修復；術后6月,角膜上皮修復,基質層中膠原排列規(guī)則,局部有小的膠原紊亂區(qū)域。
　　 4.免疫組織化學:A、B組術后角膜上皮細胞標志蛋白K3抗體AE5呈陽性表達,表明角膜上皮修復細胞為上皮細胞。
　　 結論
　　 1.膠原材料具有良好透明度、角膜曲率與一定力學強度,力學性能需進一步加強。