非血緣臍血移植后早期T淋巴細(xì)胞及其受體重排刪除環(huán)重建規(guī)律的研究.pdf

1、目的：檢測(cè)白血病患者接受非血緣臍血造血干細(xì)胞移植(umbilical cord blood transplantation,UCBT)后早期T淋巴細(xì)胞亞群的重建,同時(shí)建立T細(xì)胞受體重排刪除DNA環(huán)(T cell receptor rearrangement excision circles ,TRECs)的檢測(cè)方法并觀察其在UCBT后早期變化,探討UCBT后早期T細(xì)胞免疫重建的規(guī)律及其重建的潛能。
　　方法：選擇27例白血病患者,

2、其中21例接受UCBT、6例接受同胞外周血/骨髓干細(xì)胞移植(Peripheral Blood Stem Cell/Bone Marrow Transp lantation,sPB/BMT),使用八色流式細(xì)胞術(shù)跟蹤監(jiān)測(cè)移植后患者植入時(shí)、1月、2月、3月、4月、6月T淋巴細(xì)胞亞群的變化,另選擇年齡相當(dāng)?shù)?例正常人做對(duì)照。建立實(shí)時(shí)定量PCR(real-timePCR)技術(shù)檢測(cè)單個(gè)核細(xì)胞中TRECs的實(shí)驗(yàn)方法,檢測(cè)移植后早期患者TRECs的變化

3、。通過(guò)移植患者臨床隨訪探討并發(fā)癥出現(xiàn)與淋巴細(xì)胞亞群重建的相關(guān)性。為了進(jìn)一步明確非血緣臍血移植后發(fā)揮移植物抗腫瘤作用的主要細(xì)胞,對(duì)比不同移植物中淋巴細(xì)胞亞群。
　　結(jié)果：21例白血病患者接受UCBT后CD4+T細(xì)胞重建情況:CD4+T細(xì)胞自植入時(shí)比例(占外周血淋巴細(xì)胞)即明顯減低,移植后2月降至最低(15.24±11.43)％,后逐漸恢復(fù),但移植后6月仍未恢復(fù)正常;CD8+T亞群移植后恢復(fù)較快,植入時(shí)其比例已接近正常值,CD4/CD

4、8比值至移植后6月仍低于正常。移植后各亞群CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞在外周血中的絕對(duì)值,在植入時(shí)、移植后1月和移植后2月sPB/BMT組均高于UCBT組,移植后1月二者分別為(0.169±0.067)vs(1.068±0.474)、(0.092±0.063)vs(0.199±0.083)、(0.076±0.017)vs(0.882±0.417)(p<0.05);UCBT組CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞絕對(duì)值自移植后2月開(kāi)始恢

5、復(fù),移植后6月重建明顯高于sPB/BMT組,分別為(2.56±0.39)vs(1.66±0.36)、(0.83±0.19)vs(0.55±0.29)、(1.45±0.24)vs(0.92±0.15),但統(tǒng)計(jì)學(xué)無(wú)差異。
　　27例白血病患者移植后早期T細(xì)胞亞群重建情況:兩組移植患者均顯示記憶T細(xì)胞亞群(CD45RA-CD62L+、CD45RA-CD62L-、CD45RA+CD62L-)較初始(na?ve)T細(xì)胞亞群(CD45RA+C

6、D62L+)恢復(fù)快。UCBT后早期出現(xiàn)na?veT細(xì)胞升高,移植后2月降至最低,后再緩慢上升。移植后6月尚未達(dá)到正常水平。且UCBT組中觀察到一群CD4+終末分化效應(yīng)記憶T細(xì)胞(terminallydifferen tiate deffectormemory,TTD,CD45RA+CD62L-),其恢復(fù)的數(shù)值顯著高于移植后各時(shí)間段sPB/BMT組患者及正常對(duì)照組(P<0.05)。移植后2、3月CD4+及CD8+記憶T細(xì)胞亞群TCM(CD

7、45RA-CD62L+)、TEM(CD45RA-CD62L-)統(tǒng)計(jì)值有顯著性差異(P<0.05)
　　兩組移植后患者TRECs檢測(cè)情況:移植早期患者胸腺輸出功能低下,移植后1月均檢測(cè)不到TRECs,移植后3月僅1例UCBT患者及2例sPB/BMT患者可檢測(cè)到,且含量均明顯低于正常人。
　　結(jié)論：1.移植后早期T細(xì)胞重建較慢,CD8+T細(xì)胞亞群重建快于CD3+及CD4+T細(xì)胞亞群;2.移植后記憶T細(xì)胞重建較快,初始T細(xì)胞移植后