哈密瓜細菌性果斑病菌的分子檢測及群體遺傳分析.pdf

1、哈密瓜細菌性果斑病菌(Acidovorax avenae subsp．citrulli)是西瓜、甜瓜、哈密瓜等葫蘆科植物上的一種重要的病原細菌。近年來果斑病的發(fā)生趨勢有所上升，對我國哈密瓜生長造成嚴重威脅。哈密瓜果斑病為典型的種傳細菌病害，因此種子檢疫成為防治此病害的重要手段。本研究建立了一套快速、準確、靈敏的檢測方法，用于檢測哈密瓜種子攜帶的病原細菌。并利用BOX-PCR技術對果斑病菌進行了遺傳多樣性分析。 本研究將hrp基因

2、作為檢測靶標，根據(jù)hrpB2基因設計了一對特異性引物HB<,2>F<,2>/HB<,2>R<,2>，用此特異引物可以從哈密瓜細菌性果斑菌株中擴增出290bp的特異性片斷，而其余參試菌株和哈密瓜組織的PCR反應結(jié)果為陰性，靈敏度試驗證明可以檢測到目標菌體的濃度為10<'2>CFU。用特異性引物對哈密瓜帶菌種子浸出液進行PCR檢測，結(jié)果可發(fā)現(xiàn)目的菌的存在。該實驗首次將hrp基因做為靶標，為快速檢測病原菌提供了新的方向。 采用BOX-

3、PCR技術，對新疆、寧夏、美國等的64個哈密瓜果斑病菌進行遺傳多樣性分析，并與其它7種病原細菌進行比較。在相似率達80％時，BOX-PCR將71個參試菌株分成了7個組群，哈密瓜果斑病菌歸于1、2組群，證明哈密瓜果斑病菌與嗜酸菌屬(Acidovorax)親緣關系近，與其它屬細菌關系較遠。在相似率達90％時，BOX-PCR技術將64個果斑菌株分為5個組群，新疆、寧夏地區(qū)的菌株親緣關系非常近，并與國外的菌株親緣關系較遠。 對64個果斑