光果甘草和丹參配比提取工藝優(yōu)化及丹參脂溶性成分研究.pdf

1、　　目的：本課題主要對(duì)丹參藥材丹參酮IIA、光果甘草藥材光甘草定兩個(gè)指標(biāo)性化學(xué)成分分別進(jìn)行含量測(cè)定和藥效學(xué)研究,結(jié)合含量測(cè)定和藥效學(xué)結(jié)果分別優(yōu)選出兩種藥材的最佳提取方法,為兩種藥材配比提取提供參考依據(jù)；對(duì)光果甘草和丹參按一定比例配比混合提取進(jìn)行研究,并進(jìn)行比較分析,由含量測(cè)定和藥效學(xué)結(jié)果結(jié)合分析確定兩者最佳配比；在確定兩者最佳配比后,進(jìn)一步優(yōu)選出兩種藥材在最佳配比中的最佳提取部位(不同提取溶劑),由含量測(cè)定和藥效學(xué)結(jié)果結(jié)合分析確定兩者最

2、佳提取部位,最終確定兩種藥材在一定配比下用特定的提取溶劑提取出有效成分丹參酮IIA、光甘草定的含量和藥效為最佳結(jié)果；通過(guò)“一測(cè)多評(píng)”法以丹參酮IIA為內(nèi)標(biāo),計(jì)算丹參中二氫丹參酮I、隱丹參酮、丹參酮I的含量,并與外標(biāo)法進(jìn)行比較方法的可行性；對(duì)不同包裝儲(chǔ)藏丹參藥材中丹參酮IIA、二氫丹參酮I、隱丹參酮、丹參酮I的含量進(jìn)行測(cè)定,探明丹參藥材在儲(chǔ)藏過(guò)程中對(duì)其4種成分的影響,從而為丹參儲(chǔ)藏提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：通過(guò)對(duì)丹參和光果甘草兩

3、種藥材的提取方法和溶劑分別進(jìn)行考察,以指標(biāo)性成分(丹參酮IIA和光甘草定)的含量高低為指標(biāo),結(jié)合藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果優(yōu)選出最佳提取工藝；對(duì)不同產(chǎn)地丹參和光果甘草按上述確定的提取浸膏方法進(jìn)行測(cè)定選出含量和藥效最佳的產(chǎn)地進(jìn)行實(shí)驗(yàn)測(cè)定；采用兩種藥材不同比例(1：2, 1：1, 2：1)配比進(jìn)行提取浸膏,以浸膏中丹參酮IIA和光甘草定含量為參考指標(biāo),并將浸膏進(jìn)行藥效研究,指標(biāo)性成分含量結(jié)合其藥效研究結(jié)果分析優(yōu)選出兩種藥材最佳配比；在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步對(duì)兩

4、種藥材在最佳配比中的提取部位(不同提取溶劑)進(jìn)行研究,由含量測(cè)定和藥效學(xué)結(jié)果結(jié)合分析確定兩者最佳提取部位；通過(guò)“一測(cè)多評(píng)”法以丹參酮IIA為內(nèi)標(biāo),利用相對(duì)校正因子計(jì)算丹參中二氫丹參酮I、隱丹參酮、丹參酮I的含量,并與外標(biāo)法進(jìn)行比較驗(yàn)證方法的可行性；用不同包裝材料(紙箱、布袋、塑料袋、編織袋和密封袋)與未包裝儲(chǔ)藏丹參藥材,同時(shí)測(cè)定4種脂溶性成分的含量變化,選出最佳的儲(chǔ)藏條件。
　　通過(guò)研究確定了丹參和光果甘草在一定配比下浸膏提取

5、工藝,提取工藝為：精密稱(chēng)取丹參和光果甘草藥材共 10g(丹參和光果甘草各 5g),置同一圓底燒瓶中加 10 倍量80%乙醇提取2次,每次60min,提取得到樣品液分別過(guò)濾,濾液減壓濃縮后轉(zhuǎn)移至恒重蒸發(fā)皿中,置真空干燥箱中60℃真空干燥至恒重,稱(chēng)量干膏重,計(jì)算干膏得率,所得浸膏按下述方法進(jìn)行處理：(1)取浸膏,稱(chēng)其重量約 1g,做藥理試驗(yàn),測(cè)定其指標(biāo)性成分(丹參酮 IIA、光甘草定)的活性；(2)稱(chēng)取浸膏約 0.1g,精密稱(chēng)定,置 10m

6、l容量瓶中,加入甲醇超聲至完全溶解后,定容至刻度,搖勻,過(guò)微孔濾膜,備用,HPLC測(cè)定浸膏中指標(biāo)性成分(丹參酮IIA、光甘草定)的含量；丹參酮IIA的HPLC色譜條件為：RAINBOW Micsphere C18 (250mm×4.6 mm, 5 μm)色譜柱,流動(dòng)相：甲醇-水 (80：20)；流速：1.0 mL·min-1；柱溫：30 ℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：270 nm。柱溫30℃；光甘草定的HPLC色譜條件為：RAINBOW Micsphe

7、re C18 (250 mm×4.6 mm, 5 μm)色譜柱,流動(dòng)相：乙腈-1%冰醋酸溶液(53：47)；流速：1ml·min-1 ；柱溫：30 ℃,檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm；以丹參藥材中4種有效成分為指標(biāo)性成分,采用校正因子計(jì)算二氫丹參酮I、隱丹參酮和丹參酮 I 的含量值與外標(biāo)法實(shí)測(cè)值之間無(wú)顯著性差異；用不同包裝材料儲(chǔ)藏,考察儲(chǔ)藏時(shí)間為 8 個(gè)月,對(duì)丹參中 4 種有效成分的含量變化研究結(jié)果表明,以密封袋包裝為丹參最佳儲(chǔ)藏方式。