ITGAM和FcγRⅢA與系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病相關(guān)性的分子流行病學(xué)研究.pdf

1、背景：
　　 系統(tǒng)性紅斑狼瘡是一種全身性自身免疫性疾病，病變常累及多系統(tǒng)多器官?；颊咦钔怀龅谋憩F(xiàn)是血清中出現(xiàn)大量多種自身抗體，導(dǎo)致免疫復(fù)合物沉積和補(bǔ)體激活，引起多個(gè)系統(tǒng)和器官的損害。依據(jù)目前已知SLE發(fā)病機(jī)制的主要通路，免疫復(fù)合物清除異常是SLE發(fā)生發(fā)展的重要原因。ITGAM和FcγRIIIA都屬于免疫復(fù)合物通路，作為兩種與免疫復(fù)合物清除相關(guān)的重要免疫分子，其功能異?？蓪?dǎo)致免疫復(fù)合物處理障礙。
　　 目的：
　　

2、 （一）比較SLE患者和正常對(duì)照，SLE合并腎炎和未合并腎炎、活動(dòng)期和穩(wěn)定期SLE患者外周血單個(gè)核細(xì)胞ITGAM和FcγRIIIA mRNA水平及其蛋白表達(dá)差異，分析其與SLE疾病活動(dòng)指數(shù)、臨床及實(shí)驗(yàn)室特征的關(guān)聯(lián)，并探討二者表達(dá)水平之間的關(guān)聯(lián)；
　　 （二）Meta分析ITGAM-R77H和FcγRIIIA-F158V基因多態(tài)性與SLE遺傳易感性的關(guān)系，并分析其風(fēng)險(xiǎn)等位基因的劑量效應(yīng)關(guān)系。
　　 方法：
　　 病

3、例組來(lái)自安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院和附屬省立醫(yī)院的SLE患者60例。參照系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病活動(dòng)性指數(shù)、SLE的診斷及分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)量表自行設(shè)計(jì)調(diào)查表，收集患者的一般情況和臨床資料，并進(jìn)行SLEDAI評(píng)分。獲得研究對(duì)象知情同意后，抽取外周靜脈血。
　　 采用流式細(xì)胞術(shù)FITC、PE、PE-Cy5三染色法檢測(cè)SLE患者和正常對(duì)照組外周血ITGAM和FcγRIIIA的蛋白表達(dá)水平，并探討其臨床意義；采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)SLE患者和對(duì)照組

4、PBMC中ITGAM及FcγRIIIA mRNA水平，并探討其臨床意義；計(jì)算機(jī)檢索2009年1月以前Medline、Blackwell、Embase等數(shù)據(jù)庫(kù)并配合手工查找ITGAM-R77H和FcγRIIIA-F158V基因多態(tài)性與SLE遺傳易感性的關(guān)聯(lián)研究的文獻(xiàn)，由兩位評(píng)價(jià)員分別對(duì)篩選的文獻(xiàn)進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)，納入符合條件的研究進(jìn)行Meta分析，并探討其風(fēng)險(xiǎn)等位基因的劑量效應(yīng)關(guān)系。
　　 采用SPSS 10.01進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。經(jīng)正

5、態(tài)分布擬合優(yōu)度檢驗(yàn)，對(duì)患者組和對(duì)照組ITGAM和FcγRIIIA的表達(dá)差異采用t檢驗(yàn)或Mann-Whitney秩和檢驗(yàn)。
　　 結(jié)果：
　　 （一）SLE患者PBMC中ITGAM蛋白及mRNA水平變化及其臨床意義
　　 1.SLE患者與正常對(duì)照、SLE合并腎炎和非腎炎、活動(dòng)期和穩(wěn)定期患者PBMC中ITGAM蛋白表達(dá)水平:
　　 與正常對(duì)照組相比，SLE患者中性粒/單核/T細(xì)胞ITGAM蛋白表達(dá)均顯著降低；

6、與SLE非腎炎組相比，SLE腎炎組中性粒細(xì)胞ITGAM蛋白表達(dá)顯著降低；但SLE活動(dòng)組與SLE穩(wěn)定期組PBMC中ITGAM的蛋白表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2.SLE患者PBMC中ITGAM蛋白表達(dá)與SLEDAI的相關(guān)性：
　　 SLE患者中性粒/單核/T細(xì)胞ITGAM蛋白表達(dá)與SLEDAI均無(wú)顯著性關(guān)聯(lián)。其中SLEDAI與患者中性粒細(xì)胞/單核細(xì)胞ITGAM蛋白表達(dá)呈正相關(guān)，與T細(xì)胞的表達(dá)負(fù)相關(guān)，但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

7、
　　 3.SLE患者PBMC中ITGAM蛋白表達(dá)與臨床及實(shí)驗(yàn)室特征的關(guān)聯(lián)：
　　 伴發(fā)漿膜炎、神經(jīng)系統(tǒng)損害的SLE患者單核細(xì)胞ITGAM蛋白表達(dá)顯著升高。伴發(fā)C3降低的SLE患者中性粒細(xì)胞ITGAM蛋白表達(dá)顯著降低；伴發(fā)抗-RNP陽(yáng)性、ESR增高的SLE患者單核細(xì)胞ITGAM蛋白水平顯著升高。
　　 4.SLE患者PBMC中ITGAM mRNA水平的變化：
　　 與正常對(duì)照組相比，SLE患者組PBMC中

8、ITGAM mRNA水平顯著降低；SLE腎炎組與非腎炎組、活動(dòng)期組與穩(wěn)定期組PBMC中ITGAM mRNA水平間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義.
　　 5.SLE患者PBMC中ITGAM mRNA水平與SLEDAI的相關(guān)性：
　　 SLE患者PBMC中ITGAM mRNA水平與SLEDAI呈顯著正相關(guān)。
　　 6.SLE患者PBMC中ITGAM mRNA水平與臨床及實(shí)驗(yàn)室特征的關(guān)聯(lián)：
　　 伴發(fā)關(guān)節(jié)炎的SLE患者IT

9、GAM mRNA水平顯著升高。未發(fā)現(xiàn)ITGAM mRNA水平與實(shí)驗(yàn)室特征有顯著關(guān)聯(lián)。
　　 （二）SLE患者PBMC中FcγRIIIA 蛋白及mRNA水平變化及其臨床意義
　　 1.SLE患者和正常對(duì)照之間，SLE合并腎炎和非腎炎，活動(dòng)期組和穩(wěn)定期組PBMC中FcγRIIIA 蛋白表達(dá)水平：
　　 與SLE非腎炎組相比，SLE腎炎組NK細(xì)胞FcγRIIIA蛋白表達(dá)顯著升高；與SLE穩(wěn)定期組相比，SLE活動(dòng)組NK細(xì)

10、胞FcγRIIIA蛋白表達(dá)顯著升高；但與對(duì)照組相比，SLE患者NK及單核細(xì)胞FcγRIIIA蛋白表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 2.SLE患者PBMC中FcγRIIIA 蛋白表達(dá)與SLEDAI的相關(guān)性：
　　 SLE患者NK/單核細(xì)胞FcγRIIIA蛋白表達(dá)與SLEDAI呈負(fù)相關(guān)，但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3.SLE患者PBMC中FcγRIIIA蛋白表達(dá)與臨床及實(shí)驗(yàn)室特征的關(guān)聯(lián)：
　　 伴發(fā)關(guān)節(jié)炎的SLE患

11、者NK細(xì)胞FcγRIIIA蛋白水平顯著降低，而伴發(fā)肌炎的SLE患者FcγRIIIA蛋白顯著升高；伴發(fā)脫發(fā)、腎臟病變的SLE患者單核FcγRIIIA蛋白水平顯著升高。伴發(fā)C3降低、白細(xì)胞減少的SLE患者NK細(xì)胞FcγRIIIA蛋白水平顯著升高；伴發(fā)IgA 升高的SLE患者單核細(xì)胞FcγRIIIA蛋白水平顯著降低。
　　 4.SLE患者PBMC中FcγRIIIA mRNA水平變化與正常對(duì)照組相比，SLE患者組PBMC中FcγRIII

12、A mRNA水平顯著降低；與SLE非腎炎組相比，SLE腎炎組PBMC中FcγRIIIA mRNA水平顯著降低；SLE活動(dòng)期組與SLE穩(wěn)定期組PBMC中FcγRIIIA mRNA水平間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 5.SLE患者PBMC中FcγRIIIA mRNA水平與SLEDAI的相關(guān)性FcγRIIIA mRNA水平與SLEDAI呈負(fù)相關(guān)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(r=-0.246，P>0.05)。
　　 6.SLE患者PBMC中Fc

13、γRIIIA mRNA水平與臨床及實(shí)驗(yàn)室特征的關(guān)系伴發(fā)抗-SSB陽(yáng)性、抗-RNP陽(yáng)性、C3降低、IgG升高的SLE患者PBMC中FcγRIIIA mRNA水平顯著降低；未發(fā)現(xiàn)FcγRIIIA mRNA水平與臨床特征有顯著關(guān)聯(lián)。
　　 7.SLE患者PBMC中ITGAM和FcγRIIIA不同細(xì)胞表達(dá)水平之間的相關(guān)性分析SLE患者中性粒細(xì)胞ITGAM蛋白表達(dá)與其在單核細(xì)胞的表達(dá)呈顯著正相關(guān)。單核細(xì)胞ITGAM蛋白表達(dá)與FcγRIII

14、A表達(dá)呈正相關(guān)，與NK細(xì)胞FcγRIIIA蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；中性粒細(xì)胞ITGAM蛋白表達(dá)與NK/單核細(xì)胞FcγRIIIA蛋白表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；T淋巴細(xì)胞ITGAM蛋白表達(dá)與NK、單核細(xì)胞FcγRIIIA蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，但均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 8.SLE患者PBMC中ITGAM和FcγRIIIA mRNA水平的相關(guān)性SLE患者FcγRIIIA mRNA與ITGAM mRNA水平呈負(fù)相關(guān)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)

15、學(xué)意義。
　　 （三）Meta分析：FcγRIIIA-F158V和ITGAM-R77H與SLE遺傳易感性的關(guān)系
　　 1.FcγRIIIA-F158V與SLE遺傳易感性的Meta分析：
　　 最終有17個(gè)研究納入FcγRIIIA與SLE的Meta分析，包括3,493個(gè)SLE病人和2,426個(gè)對(duì)照，病人中1711個(gè)SLE腎炎和1782個(gè)SLE非腎炎，其中1855個(gè)歐洲裔，409個(gè)非洲裔，1229個(gè)亞洲裔。Meta分

16、析分為三組比較：SLE vs.對(duì)照，SLE腎炎vs.SLE非腎炎，SLE非腎炎vs.對(duì)照。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在總?cè)巳褐校?58F等位基因與SLE的遺傳易感性顯著相關(guān)，并且純合子FF基因型在SLE組呈現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系。按種族分層發(fā)現(xiàn)，158F等位基因與歐洲和亞洲裔SLE顯著相關(guān)，且純合子FF基因型僅在亞洲人群SLE中呈現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系；158F等位基因僅與亞洲人SLE合并腎炎組顯著相關(guān)；純合子FF基因型與亞洲裔、歐洲裔SLE較非洲裔SLE關(guān)聯(lián)強(qiáng)。

17、r>　　 2.ITGAM-R77H與SLE遺傳易感性的Meta分析：
　　 共納入了5個(gè)GWAS研究，包括12123個(gè)病人和17106個(gè)對(duì)照，Meta分析結(jié)果發(fā)現(xiàn)：風(fēng)險(xiǎn)等位基因A與SLE的遺傳易感性顯著相關(guān)，純合子AA vs GG。
　　 結(jié)論：
　　 （1）SLE患者PBMC中ITGAM mRNA及其蛋白表達(dá)均顯著降低，且mRNA水平與SLEDAI呈顯著正相關(guān)；SLE患者PBMC中FcγRIIIA蛋白水平無(wú)異

18、常表達(dá)，但發(fā)現(xiàn)mRNA水平顯著降低。SLE腎炎組FcγRIIIA蛋白顯著升高但mRNA水平顯著降低。不同臨床特征及疾病活動(dòng)度SLE患者ITGAM和FcγRIIIA表達(dá)有差異。
　　 （2）SLE患者中性粒與單核細(xì)胞ITGAM的表達(dá)呈顯著正相關(guān)?；颊逨cγRIIIA與ITGAM mRNA水平及蛋白表達(dá)均呈負(fù)相關(guān)趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。尚不能確定FcγRIIIA與ITGAM在SLE發(fā)病中有相加作用，還需進(jìn)一步蛋白質(zhì)組學(xué)研究。