多重巢式RT-PCR技術(shù)在急性髓系白血病中的應(yīng)用.pdf

1、目的：探討多重巢式RT—PCR技術(shù)對(duì)急性髓系白血病(acutemyeloidleukemia，AML)中常見融合基因的表達(dá)及其在各亞型的分布和克隆性染色體異常的檢出情況。 方法：采用多重巢式RT—PCR技術(shù)對(duì)80例初診AML病例檢測(cè)常見的融合基因和MLL基因重排，選取轉(zhuǎn)錄因子E2A作為內(nèi)對(duì)照同步進(jìn)行轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增。所有病例同時(shí)進(jìn)行染色體R或G顯帶。 結(jié)果：80例AML患者PCR檢測(cè)成功77例，36例(46.8％)檢出融合基因

2、，包括AML1/ETO、PML/RARα、PLZF/RARα、CBFβ/MYH11、MLL基因異常包括MLL/AF6、MLL/AF9、MLL/AF10、MLL/ELL)、TLS/ERG、AML1/MDS1(EVI-1)，同時(shí)進(jìn)行染色體R或G顯帶的病例中有74例可供分析，其中34例(45.9％)檢出染色體結(jié)構(gòu)和數(shù)目異常；40例正常核型者檢出AML1/ETO、PML/RARα、PLZF/RARα、CBFβ/MYH11四種融合基因。聯(lián)合多重R

3、T—PCR可使AML克隆性染色體異常檢出率增至70.3％(52/74)。 針對(duì)MLL基因重排設(shè)計(jì)的多重PCR使77例檢測(cè)成功患者中10例(13.0％)分別被檢出存在6種MLL基因陽(yáng)性，分別為MLL/AF6、MLL/AF9、MLL/AF10、MLL/AF17、MLL/ELL、MLL/MLL。在FAB分型中的分布：1例M2，2例M4，7例M5，其中M4和M5各占20.0％和70.0％。 結(jié)論：1多重巢式RT—PCR技術(shù)可在核