土木香內(nèi)酯在大鼠體內(nèi)的藥動學研究及生物酶法提取當歸活性成分的新工藝研究.pdf

1、土木香和當歸均為中醫(yī)常用藥材。土木香中揮發(fā)油的主要成分土木香內(nèi)酯具有較好的驅(qū)蟲、抗炎等藥理活性，但其在動物體內(nèi)相關的藥動學特性尚未見報道，這在一定程度上限制了土木香內(nèi)酯的臨床研究和制劑開發(fā)。當歸作為我國臨床常用中藥，其藥理活性已然確證，但目前對當歸活性成分的提取工藝都是采用水煮或用大量有機溶劑針對某一種(或某一類)組分進行提取，致使藥材利用率不高，活性成分損失較大，而且大量有機溶劑的使用對環(huán)境造成污染。綜上所述，本課題主要從以下幾個方面

2、進行研究：
　　 第一、本課題采用反相高效液相色譜法研究土木香內(nèi)酯經(jīng)靜脈注射和口服給藥后在大鼠體內(nèi)的藥動學特性。以14mg/kg的劑量靜脈注射土木香內(nèi)酯后，其在大鼠體內(nèi)的藥動學模型符合二室模型，主要藥動學參數(shù)為T1/2β＝35.897±6.965min，ClB＝0.00223(L/kg)/min，AUC＝6.464±0.109g·min·L-1，Ke＝0.061±0.009min-1；以30mg/kg的劑量灌胃給藥后，土木香內(nèi)酯

3、在大鼠體內(nèi)的藥動學模型符合一室模型，主要藥動學參數(shù)為：T1/2＝44.999±7.017min，Cmax＝268.723±15.261μg/mL，Tmax＝31.385±9.643min。本課題通過對土木香內(nèi)酯在大鼠體內(nèi)經(jīng)靜脈注射和口服兩種途徑給藥后的藥動學特性進行研究，為土木香內(nèi)酯的進一步研究開發(fā)提供理論依據(jù)。
　　 第二、本課題通過生物酶法處理當歸，以阿魏酸和多糖提取率作為評價指標，研究酶用量、酶解溫度、酶解時間及pH等單因

4、素對其提取率的影響，進而采用正交實驗和篩選復合酶對工藝條件進行優(yōu)化。本研究所得新工藝將水提法與酶解法有效結合起來，使阿魏酸提取率與傳統(tǒng)醇提法相當。而且本工藝可實現(xiàn)當歸主要活性成分阿魏酸、藁本內(nèi)酯和多糖的共提取，達到對當歸的綜合利用的目的。采用生物酶法單獨提取當歸多糖，通過單因素和正交實驗，研究所得工藝可使多糖提取率較傳統(tǒng)提取方法提高7.52％。經(jīng)MTT法評價生物酶法提取所得當歸多糖對hela細胞的抑制活性，結果顯示該多糖具有較好的抗腫瘤

5、活性。
　　 第三、本課題從當歸根、莖、葉及栽培土中篩選內(nèi)生菌，然后就當歸內(nèi)生菌與其主要活性成分阿魏酸和藁本內(nèi)酯的相關性進行研究。實驗首先確定無菌當歸苗的最適栽培條件，然后利用篩選所得內(nèi)生菌浸染無菌當歸苗，培養(yǎng)14天后用高效液相色譜法測定當歸苗中藁本內(nèi)酯和阿魏酸含量的變化，并進行相關性分析。結果表明，當歸內(nèi)生真菌和混合菌對活性成分(藁本內(nèi)酯、阿魏酸)的產(chǎn)生有促進作用，其中內(nèi)生真菌的促進作用更為明顯，藁本內(nèi)酯產(chǎn)量增加6.6倍，阿魏