RNA干擾靶向低氧誘導因子-1α治療胃癌的實驗研究.pdf

1、低氧誘導因子-1α(hypoxia inducible factor-lalpha，HlF-1α)是轉(zhuǎn)錄因子-低氧誘導因子-1(hypoxia inducible factor,HIF-1)的氧調(diào)節(jié)亞基，是一種缺氧依賴性蛋白質(zhì)，起著主要缺氧調(diào)節(jié)作用，決定HIF-1活性。HIF-1a在正常氧分壓時很快被泛素依賴的蛋白水解酶水解，缺氧時在細胞內(nèi)很快穩(wěn)定并聚集，蛋白表達水平迅速增加，與HIF-1β結(jié)合構(gòu)成異源二聚體，HIF-1大量表達，活性顯

2、著增高，進而啟動涉及改善低氧條件的一系列基因表達，腫瘤細胞通過糖酵解速率提高和多血管體系形成，對低氧環(huán)境發(fā)生一系列適應性反應，在維持腫瘤細胞的能量代謝、新血管生成、促進腫瘤增殖和轉(zhuǎn)移中起重要作用，同時增加了腫瘤對化放療的抗拒性。 RNA干擾(RNA interfering，RN,Ai)是一種轉(zhuǎn)錄后基因沉默(Post-transcriptional gene silence，PTGS)的基因阻斷技術(shù)，近年來被廣泛應用于哺乳動物細胞

3、抑制基因表達。通過RNase III內(nèi)切酶Dicer的作用產(chǎn)生有活性的小的21-23nt干擾性RNA(short interence RNA，siRNA)，介導其互補同源mRNA序列的特異性降解，沉寂目的基因的表達。 本課題采用RNAi技術(shù)，設計并合成針對HIF-1α基因的siRNA，轉(zhuǎn)染胃腺癌細胞株BGC-823細胞，并進行裸鼠皮下移植瘤實驗，檢測HIF-1αmRNA 水平和蛋白水平表達的變化；觀察siRNA對胃癌細胞生長的影