一種新的絲氨酸蛋白酶-SNC19（ST14）基因編碼蛋白的生物特性的研究.pdf

1、為進(jìn)一步研究SNC19（ST14）蛋白的生物特性,以及其在腫瘤轉(zhuǎn)移中的可能作用,該實(shí)驗(yàn)在核酸水平的研究基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)：1,將SNC19（ST14）基因克隆到原核表達(dá)質(zhì)粒,表達(dá)純化SNC19（ST14）-GST融合蛋白;2,用SNC19（ST14）-GST融合蛋白免疫小鼠,按雜交瘤技術(shù)制備SNC19（ST14）蛋白單克隆抗體;3,利用生物信息學(xué)方法進(jìn)行SNC19（ST14）蛋白的結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)和功能分析;4,在mRNA水平用RT-PCR的方法研究在

2、正常大腸黏膜及相應(yīng)腫瘤組織中表達(dá);在蛋白水平應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法研究政黨消化道與相慶腫瘤組織表達(dá)分布情況,并研究在其他腫瘤中表達(dá)的情況,同時(shí)研究SNC19蛋白與其相關(guān)蛋白HAI-1蛋白在組織表達(dá)中的關(guān)系;5,用PCR-DNA序列分析的方法比較正常大腸黏膜及相應(yīng)腫瘤組織中SNC19（ST14）基因組DNA外顯子序列的差異分析SNC19（ST14）基因突變情況.1.SNC19原核表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建及融合蛋白的表達(dá);2.SNC19單克隆抗體的制備

3、和生物學(xué)特性鑒定;3.SNC19蛋白結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè)和功能分析;4.SNC19及其相關(guān)蛋白HAI-1在一些正常及腫瘤組織中表達(dá)分布的研究;5.SNC19基因突變情況的研究.結(jié)論：1.原核表達(dá)SNC19基因cDNAR的部分ORF成功,并獲得純化的SNC19-GST融合蛋白.2.成功制備抗SNC19單克隆抗體ZMG9,有較高的特異性和敏感性.3.SNC19蛋白是一種新的Ⅱ型跨膜絲氨酸蛋白酶,其結(jié)構(gòu)上的特點(diǎn)顯示該蛋白與細(xì)胞表面發(fā)生的蛋白水解有關(guān).4.