室旁核中硫化氫在慢性間歇性低氧誘發(fā)高血壓中的作用及其機(jī)制.pdf

1、背景:
　　阻塞性睡眠呼吸暫停綜合征(OSAS)與高血壓的關(guān)系十分密切。睡眠呼吸暫停時(shí)可產(chǎn)生慢性間歇性低氧(CIH),其被認(rèn)為是引起高血壓的最為重要的因素。下丘腦室旁核(PVN)能控制交感節(jié)前神經(jīng)元和心血管活動,是整合心血管活動的重要核團(tuán),也與高血壓的發(fā)生和維持密切相關(guān)。H2S作為一種信號分子具有舒張血管和心肌保護(hù)作用,因此,我們推測PVN中H2S很可能作為信號分子與CIH引起的高血壓有關(guān)。
　　目的:
　　(1)研究

2、PVN中H2S在慢性間歇性低氧誘發(fā)高血壓中的作用及其機(jī)制;
　　(2)觀察升高H2S水平對慢性間歇性低氧誘發(fā)高血壓的防治作用。
　　方法:
　　實(shí)驗(yàn)采用慢性間歇性低氧誘發(fā)高血壓模型大鼠,應(yīng)用Powerlab尾動脈測壓系統(tǒng)監(jiān)測大鼠尾動脈收縮壓(SBP),采用立體定位儀對大鼠雙側(cè)PVN定位和微量注射,利用Powerlab生物信號采集系統(tǒng),在體記錄腎交感神經(jīng)放電活動(RSNA)、平均動脈壓(MAP)和心率(HR),使用酶聯(lián)免

3、疫分析(ELISA)試劑盒檢測胱硫醚-β-合成酶(CBS)和胱硫醚-γ-裂解酶(CSE)的活性。
　　(1)慢性間歇性低氧誘發(fā)高血壓大鼠模型制備。
　　實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為對照組(Control)和慢性間歇性低氧組(CIH),Control組不進(jìn)行慢性間歇性低氧,其余處理均與CIH相同。CIH組大鼠進(jìn)行慢性間歇性低氧處理15天,觀察CIH對大鼠血壓和交感神經(jīng)活動的影響。
　　(2)慢性間歇性低氧對大鼠PVN中H2S水平、C

4、BS及CSE活性的影響。
　　采用GENMED組織H2S含量比色法定量檢測試劑盒檢測Control組和CIH組大鼠PVN中H2S水平,觀察慢性間歇性低氧是否引起大鼠PVN中H2S水平的降低。使用ELISA試劑盒檢測Control組和CIH組大鼠PVN中CBS及CSE活性的變化。
　　(3)急性改變PVN內(nèi)H2S水平對大鼠血流動力學(xué)和交感神經(jīng)活動的影響。
　　在Control組和CIH組大鼠的雙側(cè)PVN注射H2S的前體L

5、-Cysteine、供體NaHS和CBS的抑制劑AOA、激動劑SAM,觀察PVN中H2S水平改變對MAP和RSNA的影響。
　　(4)口服L-Cysteine對大鼠血流動力學(xué)和交感神經(jīng)活動的影響。
　　將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為Control組(Control)、CIH組(CIH)、Control+L-Cysteine組(Control+L-Cys)、CIH+L-Cysteine組(CIH+L-Cys),每組20只。Control組

6、和CIH組每天自由飲水,不做灌胃處理。Control+L-Cys組和CIH+L-Cys組從造模前一天直至造模結(jié)束,每天對大鼠進(jìn)行L-Cysteine灌胃處理,直至造模結(jié)束。觀察通過口服L-Cysteine改變H2S的水平對大鼠血流動力學(xué)和交感神經(jīng)活動的影響。
　　(5)口服L-Cysteine對大鼠PVN中H2S水平的影響
　　采用 GENMED組織 H2S含量比色法定量檢測試劑盒檢測實(shí)驗(yàn)大鼠 PVN中H2S。觀察從造模前一

7、天直至造模結(jié)束,每天對大鼠進(jìn)行L-Cysteine灌胃處理,觀察大鼠PVN中H2S水平的改變。
　　(6)口服L-Cysteine對大鼠PVN中CBS、CSE活性的影響。
　　采用ELISA試劑盒檢測Control組和CIH組大鼠PVN中CBS及CSE活性的變化。
　　結(jié)果:
　　(1)CIH可顯著性升高大鼠血壓,增強(qiáng)交感神經(jīng)活動;
　　(2)CIH可引起大鼠PVN中H2S水平的明顯降低,CBS的活性明顯增

8、加,而CSE的活性沒有明顯改變。
　　(3)雙側(cè)PVN中注射H2S前體L-cysteine和供體NaHS可以引起Control組和CIH組MAP、RSNA的下降;與Control組MAP、RSNA降低的程度比CIH組更明顯。雙側(cè)PVN中注射CBS的抑制劑AOA可引起Control組MAP、RSNA明顯增加,而CIH組MAP、RSNA沒有明顯變化;雙側(cè)PVN中注射CBS的激動劑SAM(10mol/L)可引起CIH組MAP、RSNA的

9、下降,而Control組MAP、RSNA沒有明顯變化。
　　(4)口服L-Cysteine可降低由CIH誘發(fā)的大鼠血壓升高和交感神經(jīng)活動增強(qiáng),但不能降低到正常水平。
　　(5)口服L-Cysteine可升高由CIH誘發(fā)的大鼠PVN內(nèi)H2S水平的降低,但不能恢復(fù)至正常水平。
　　(6)口服L-Cysteine可降低由CIH誘發(fā)的大鼠PVN內(nèi)CBS活性的增加,但不能降低至正常水平。
　　結(jié)論:
　　1.CIH大