全自動(dòng)DNA圖像分析(DAN-ICM)在乳腺細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)(FNAC)診斷中的應(yīng)用.pdf

1、目的：乳腺癌是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，近年來(lái)在我國(guó)，特別是大城市內(nèi)的發(fā)病率呈直線上升趨勢(shì)。乳腺癌的早期診斷對(duì)降低死亡率，提高生存率具有重要意義。乳腺的細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)(FNAC)是早期診斷最常用的一種方法。本文研究全自動(dòng)DNA圖像分析（DNA-ICM）系統(tǒng)與細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)(FNAC)在細(xì)胞學(xué)診斷中的敏感性、特異性、陽(yáng)性準(zhǔn)確率、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值，探討全自動(dòng)DNA圖像分析(DNA-ICM)系統(tǒng)在乳腺細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)(FNAC)診斷中的應(yīng)

2、用。同時(shí)探討DNA含量與Ki-67抗原的表達(dá)及臨床病理特征的關(guān)系，為乳腺癌的診斷和評(píng)價(jià)預(yù)后提供一定的理論依據(jù)。
　　 材料與方法：收集河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院病理科細(xì)胞室2009年9月-2010年1月乳腺腫塊行細(xì)針穿刺(FNA)患者95例，患者術(shù)前均未放療和化療，且均無(wú)遠(yuǎn)處臟器的轉(zhuǎn)移。術(shù)后組織病理證實(shí)浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌74例，浸潤(rùn)性小葉癌5例，浸潤(rùn)性小葉，導(dǎo)管混合型乳腺癌1例，腺泡細(xì)胞癌2例，髓樣癌1例，乳腺腺病8例，乳腺纖維腺瘤1例，導(dǎo)

3、管內(nèi)乳頭狀瘤2例，脂肪壞死1例。
　　 95例患者術(shù)前行細(xì)針穿刺(FNA)，抽吸足量細(xì)胞后，均勻涂于6張玻片，隨機(jī)分三組，各兩張，半濕固定，95％乙醇固定進(jìn)行涂片細(xì)胞學(xué)檢查、免疫細(xì)胞學(xué)檢測(cè)（細(xì)胞增殖標(biāo)志物Ki-67），無(wú)水乙醇固定進(jìn)行DNA倍體檢測(cè)。細(xì)胞學(xué)檢測(cè)是將細(xì)針穿刺后的涂片，巴氏染色后，作細(xì)胞病理學(xué)的描述診斷。DNA-ICM檢測(cè)是將細(xì)針穿刺后的涂片，F(xiàn)eulgen染色后，置于全自動(dòng)圖像分析儀的顯微鏡上，人工調(diào)試到20×的物

4、鏡上，自動(dòng)聚焦，自動(dòng)掃描，將載玻片上有細(xì)胞的部分，劃分為1080個(gè)小區(qū)域，逐一區(qū)域掃描，記錄掃描數(shù)據(jù)。自動(dòng)地測(cè)定出每例玻片上所有細(xì)胞分類參數(shù)，幾何參數(shù)，圖像參數(shù)等參數(shù)，同時(shí)給出橫軸為IOD(Integrated Optical Density)值，縱軸為細(xì)胞數(shù)量的DNA含量分布的直方圖；橫軸是IOD值，縱軸是細(xì)胞核面積的核面積的分布圖。同時(shí)給出平均DI值(DNA index)，標(biāo)準(zhǔn)差，變化系數(shù)。所有掃描細(xì)胞DNA含量最高的前20例細(xì)胞的

5、IOD（Integrated Optical Density）值和鏡下影像圖片。
　　 運(yùn)用免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)的方法，檢測(cè)細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)(FNAC)涂片中抗原Ki-67的表達(dá)情況，同時(shí)收集臨床資料及術(shù)后組織病理資料。
　　 結(jié)果：95例患者中乳腺細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)(FNAC)診斷為乳腺癌的為48例，ICM檢測(cè)均可見(jiàn)大量的DNA倍體異常細(xì)胞，組織病理證實(shí)均為乳腺癌；22例FNAC診斷為重度增生乳腺上皮細(xì)胞，ICM檢測(cè)19例可見(jiàn)D

6、NA倍體異常細(xì)胞，3例未檢測(cè)到DNA倍體異常細(xì)胞，22例組織病理證實(shí)均為乳腺癌。
　　 11例FNAC診斷為明顯增生乳腺上皮細(xì)胞，5例ICM可見(jiàn)DNA倍體異常細(xì)胞，組織病理證實(shí)4例為乳腺癌，1例為增生性腺病。6例ICM未見(jiàn)DNA倍體異常細(xì)胞，組織病理證實(shí)5例為乳腺癌，1例為導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤；14例FNAC檢測(cè)為良性病變，1例ICM檢測(cè)可見(jiàn)倍體異常細(xì)胞，組織病理證實(shí)為良性病變。
　　 DNA圖像分析(DNA-ICM)系統(tǒng)診斷

7、的陰性預(yù)測(cè)值不如FNAC診斷;DNA-ICM診斷的敏感性，陽(yáng)性準(zhǔn)確率，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值均不及DNA-ICM和細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)(FNAC)的聯(lián)合診斷；二者聯(lián)合的各項(xiàng)診斷指標(biāo)均比單純的FNAC檢測(cè)高，但沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 隨著細(xì)胞增生程度的增加，DI均值增加。重度增生的乳腺上皮細(xì)胞與明顯增生乳腺上皮細(xì)胞之間，乳腺癌細(xì)胞與重度增生的乳腺上皮細(xì)胞之間的DNA含量均有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；隨著細(xì)胞免疫化學(xué)檢測(cè)增殖抗原Ki-67分級(jí)的增加，DNA含

8、量也增加，且DNA含量的增加具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；根據(jù)術(shù)后組織病理資料分析，DNA含量與腫物大小及組織學(xué)分級(jí)顯著相關(guān)，但DNA含量與患者年齡及腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀況無(wú)關(guān)。
　　 結(jié)論：
　　 1、對(duì)于大多數(shù)乳腺腫物，DNA-ICM和FNAC診斷一致，DNA-ICM可以作為FNAC的一種良好的輔助檢測(cè)方法。
　　 2、DNA-ICM的各項(xiàng)診斷指標(biāo)均不如FNAC診斷，但DNA-ICM聯(lián)合FNAC診斷較單一診斷有一定優(yōu)勢(shì)。