FHL1基因與心肌細胞分化關系的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：觀察FHL1(Four and a half LIM domains protein 1)基因在P19細胞向心肌細胞誘導分化過程中表達水平的變化；通過構建FHL1基因過表達(overexpression)載體，探討FHL1基因過表達對P19細胞向心肌細胞分化的影響。 方法:(1)P19細胞經1％二甲基亞砜(DMSO)誘導懸浮培養(yǎng)4d形成細胞聚集體，將聚集體用生長培養(yǎng)基粘附培養(yǎng)至14d，觀察細胞跳動情況，用肌鈣蛋白I(cTn

2、I)抗體行Western Blot以鑒定心肌細胞分化，采用RT-PCR、Western Blot技術在細胞分化成熟的不同時段檢測P19細胞中FHL1基因mRNA和蛋白的表達水平； (2)構建FHL1基因的過表達載體，轉染P19細胞后，以1％二甲基亞砜(DMSO)誘導分化，采用RT-PCR技術在細胞分化成熟的不同時段檢測P19細胞中心肌分化標志基因MEF-2c、GATA-4的mRNA表達水平，Western Blot技術檢測cTnI蛋白的

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