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1、【目的】從細(xì)胞水平探討胸腺五肽延緩衰老的作用和初步機(jī)制?!痉椒ā渴紫葘π∈笃つw成纖維細(xì)胞培養(yǎng)方法進(jìn)行研究,然后通過臺盼藍(lán)染色法檢測細(xì)胞活力、細(xì)胞生長曲線測定細(xì)胞增殖能力、HE染色法測定細(xì)胞形態(tài)、染色體分析鑒定其鼠源性、免疫組化染色對成纖維細(xì)胞進(jìn)行特異性鑒定,最后以小鼠皮膚成纖維細(xì)胞作為給藥載體,以細(xì)胞的增殖、傳代數(shù)、存活天數(shù)、細(xì)胞內(nèi)超氧化岐化酶(SOD酶)活力、丙二醛(MDA)含量研究胸腺五肽的抗衰老效應(yīng)。【結(jié)果】在原代小鼠皮膚成纖維細(xì)
2、胞培養(yǎng)上,得出一種較常規(guī)做法更為快捷、有效的胰蛋白酶消化法,和有利于細(xì)胞純化、生長、傳代、凍存的方法,為后續(xù)細(xì)胞實驗奠定基礎(chǔ)。通過臺盼藍(lán)染色法檢測細(xì)胞活力,顯示原代細(xì)胞存活率大于65%、傳代細(xì)胞存活率大于95%;顯示其細(xì)胞增殖能力符合一般細(xì)胞生長趨勢,生長狀態(tài)穩(wěn)定;細(xì)胞形態(tài)測定表明所培養(yǎng)細(xì)胞為典型成纖維細(xì)胞結(jié)構(gòu);染色體核型為二倍體n=40,確定了細(xì)胞的鼠源性;波形蛋白免疫組化染色成陽性說明其為成纖維細(xì)胞。與陰性對照組比較的結(jié)果表明,胸腺
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