AEs和CLCs蛋白在大鼠心肌細(xì)胞缺氯-復(fù)氯損傷中的表達(dá).pdf

1、目的:觀察心肌細(xì)胞缺氯/復(fù)氯處理后是否引起細(xì)胞損傷及其AEs和CLCs蛋白的表達(dá)。
　　 方法:SD新生大鼠(1～3 d),雌雄不拘,無菌取出心臟,分離附著組織,胰蛋白酶消化,純化制成心肌細(xì)胞；培養(yǎng)第4 d隨機(jī)分為2組:正常對(duì)照(Control)組、缺氯/復(fù)氯組。分別觀察:①心肌細(xì)胞搏動(dòng)頻率；②細(xì)胞存活率(MTT法)；③培養(yǎng)液LDH的活性；④RT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞中AEs和CLCs的mRNA含量；⑤WesternBlotting

2、法檢測(cè)細(xì)胞中AEs蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)果:①細(xì)胞搏動(dòng)頻率:Control組(93±15 beats/min)與缺氯/復(fù)氯組(39±10 beats/min)相比有顯著性差異(p〈0.01)；②細(xì)胞存活率:Control組(87.5±7.9％)與缺氯/復(fù)氯組(43.4±8.3％)相比有顯著性差異(p〈0.01)；③LDH活性:Control組(3.31±0.56 IU/L)與缺氯/復(fù)氯組(29.60±1.69IU/L)相比有顯著

3、性差異(p〈0.01)；④CLCs及AEs mRNA含量變化:AE1、AE2、AE3和CLC-2、CLC-3、CLC-4、CLC-5、CLC-6、CLC-7在正常心肌細(xì)胞中有基礎(chǔ)表達(dá)；AE2、CLC-2和CLC-4 mRNA缺氯/復(fù)氯組與Control組相比無顯著性差異(p〉0.05)；經(jīng)缺氯/復(fù)氯處理后,AEl和AE3 mRNA明顯上調(diào)(p〈0.01),CLC-3、CLC-5、CLC-6、CLC-7 mRNA明顯下調(diào)(p〈0.01)；