VDAC2在高位脊髓損傷大鼠心肌細(xì)胞線粒體凋亡通路中的作用.pdf

1、目的：
　　觀察電壓依賴性陰離子通道2（VDAC2）在大鼠高位脊髓損傷后心肌細(xì)胞線粒體凋亡通路中的表達(dá)，初步探討VDAC2在高位脊髓損傷后心肌細(xì)胞凋亡中的作用。
　　方法：
　　健康雄性SD大鼠（清潔級）48只，體重200~250 g。隨機(jī)分為八組（每組n=6）：假手術(shù)對照（TC）組：假手術(shù)后6 h（TC1）、假手術(shù)后12 h（TC2）、假手術(shù)后24 h（TC3）和假手術(shù)后48 h（TC4）；高位脊髓損傷組（TS）：S

2、CI損傷后6 h(TS1)、12 h(TS2)、24 h(TS3)和48 h(TS4)。采用改良的Allens打擊法，建立高位脊髓損傷大鼠模型，假手術(shù)組只暴露脊髓，不進(jìn)行打擊。剪取SD大鼠心尖部心肌組織，使用透射電鏡觀察心肌細(xì)胞的形態(tài)學(xué)特征；通過原位末端標(biāo)記法（Tunel法）檢測心肌細(xì)胞的凋亡率；采用Western blot法檢測心肌組織Bax、Bcl-2和VDAC2蛋白的水平，RT-PCR法測定Bax、Bcl-2和VDAC2 mRNA

3、的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　?、偻干潆婄R結(jié)果顯示TC組各時點(diǎn)大部分心肌細(xì)胞細(xì)胞膜完整；肌原纖維、肌絲排列整齊，清晰可見；線粒體結(jié)構(gòu)完整，未見空泡樣變性和腫脹；閏盤結(jié)構(gòu)正常，糖原顆粒豐富，心肌損傷情況明顯比TS組同時相輕。
　?、赥unel結(jié)果顯示TS組較TC組存在明顯的細(xì)胞凋亡(P<0.01)。
　?、踂estern blot和RT-PCR結(jié)果相同，顯示TC組Bax、Bcl-2和VDAC2均有表達(dá)，各時相點(diǎn)間差異無統(tǒng)

4、計(jì)學(xué)意義；TS組Bax表達(dá)增高，以TS3為著，各時相點(diǎn)與TC組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；TS組Bcl-2表達(dá)量于損傷后第6 h、12 h、24 h下降，損傷后第48h表達(dá)量恢復(fù)，各時相點(diǎn)與TC組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。同時，TS組Bax/Bcl-2比值增高，TS組與TC組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。TC組VDAC2有較高水平表達(dá)，TS組12 h、24 h、48 h表達(dá)受抑制，與TC組比較，差異均