動脈硬化閉塞癥患者下肢缺血肌肉的形態(tài)學及線粒體功能的變化研究.pdf

1、目的
　　 隨著我國人口的老齡化和國人飲食習慣的改變,下肢動脈硬化閉塞癥患者不斷增多,嚴重威脅國人的健康。它不僅會使患者出現(xiàn)間歇性跛行,而且在嚴重缺血時會使患者出現(xiàn)靜息痛、肢體壞死及截肢,嚴重影響患者的生活質量,甚至危及生命。下肢動脈硬化閉塞癥引起肢體缺血后,肌肉組織的形態(tài)會發(fā)生變化,進而影響下肢的功能。線粒體是糖類、脂肪和氨基酸等物質最終氧化釋能的場所,主要功能是進行氧化磷酸化、合成ATP,為細胞生命活動提供能量。而缺血后骨骼

2、肌發(fā)生的一系列的變化,比如Ca2+濃度及線粒體通透性轉換孔(MPTP)的開放程度的提高會使線粒體功能異常,引起骨骼肌細胞不可逆性損傷。目前的相關研究多限于研究動物細胞胞漿內的Ca2+濃度及MPTP的變化,對人體下肢缺血肌肉線粒體基質內Ca2+攝取和釋放能力及MPTP開放程度的研究尚未見報導。本研究旨在明確動脈硬化閉塞癥患者下肢缺血肌肉的形態(tài)學變化及線粒體功能的變化和意義,尋求治療下肢動脈閉塞性疾病的新靶點。
　　 實驗方法

3、>　　 選取2009年12月到2012年1月中國醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院血管甲狀腺外科因下肢動脈硬化閉塞癥導致缺血而截肢的患者,以及骨科非血管病變下肢截肢患者的腓腸肌、比目魚肌、趾長伸肌標本各2處(大小約1cmx1cmx1cm),標本共采集28例,(其中血管甲狀腺外科因下肢動脈硬化閉塞癥而缺血截肢的肌肉標本20例作為實驗組,骨科非缺血肌肉標本8例作為對照組),將肌肉標本中1份用石蠟包埋后行HE染色,用于光鏡下觀察缺血肌肉的形態(tài)變化;其余部

4、分肌肉標本用錫鉑紙包好放入Eppendorf管中保存于-80℃冰箱中備用,行線粒體游離Ca2+濃度測定及MPTP的開放程度測定。缺血實驗組再按照有無糖尿病分為糖尿病組與非糖尿病亞組,進一步比較兩組線粒體Ca2+濃度及MPTP開放程度。
　　 實驗結果
　　 實驗組各肌肉細胞大小不等、形態(tài)不規(guī)則,而對照組各肌肉細胞均勻、飽滿,沒有萎縮的跡象。實驗組中腓腸肌、比目魚肌、趾長伸肌的線粒體Ca2+濃度及MPTP開放程度均顯著高于