葡萄多糖的分離、純化及抗腫瘤研究.pdf

1、葡萄是新疆的特產(chǎn)。為了開發(fā)新疆葡萄資源，本論文以新疆葡萄為原料，對兩個品種葡萄多糖(Vitis Linn Polvsaccharide，VLP)的分離、純化和抗腫瘤特性進(jìn)行了深入研究，為今后葡萄多糖的更深入研究與開發(fā)奠定了基礎(chǔ)。 通過對葡萄多糖提取的單因素選擇實(shí)驗(yàn)，確定了浸提的溫度、時間、料液比、浸提次數(shù)為正交實(shí)驗(yàn)時的四個因素，通過正交實(shí)驗(yàn)確定了無核白葡萄多糖(VLP-B)和火焰紅葡萄多糖(VLP-H)水提取最佳工藝條件為：溫度

2、為95℃，時間為2h，料液比為1:2，提取次數(shù)為2次；采用以上條件進(jìn)行提取，經(jīng)乙醇沉淀、石油醚脫脂、Sevage法脫蛋白、透析、真空濃縮、干燥后，得到絮狀棕褐色粗多糖，測其粗多糖得率為：無核白2.86％、火焰紅無核2.67％。用苯酚一硫酸法測得葡萄多糖含量分別為：無核白6.42％，火焰紅無核5.36％。 兩種葡萄粗多糖上DEAE-SephadexA-25柱層析，分別得到3個級分的多糖：VLP-B1、 VLP-B2、VLP-B3和

3、VLP-H1、 VLP-H2、VLP-H3。經(jīng)純度鑒定和理化分析表明這3個級分的葡萄多糖為均一多糖，不含游離單糖、蛋白質(zhì)和核酸、淀粉等物質(zhì)。以葡萄粗多糖為起始原料計(jì)算，3個級分的純品多糖相對得率分別為：VLP-B128.63％、VLP-B2 48.29％、VLP-B312.56％和VLP-H1 27.81％、VLP-H2 49.97％、VLP-H3 11.22％。 比較研究了8種葡萄多糖的體外抗腫瘤效果，采用體外培養(yǎng)法培養(yǎng)細(xì)胞，

4、MTT比色法比較8種葡萄多糖在7個質(zhì)量濃度下對HeLa細(xì)胞、B37細(xì)胞、BGC823細(xì)胞、A973細(xì)胞、KB細(xì)胞的體外抑制作用，隨著葡萄多糖質(zhì)量濃度的增加，對5種腫瘤細(xì)胞的抑制作用不斷增強(qiáng)，而且呈現(xiàn)一定的劑量依賴效應(yīng)。VLP-B0比VLP-B1、VLP-B2、VLP-B3的抑瘤效果強(qiáng)，VLP一H0比VLP-H1、VLP-H2、VLP-H3的抑制效果強(qiáng)，而VLP-B品種的抑制效果較VLP-H品種的抑制效果強(qiáng)。經(jīng)計(jì)算，對于HeLa、B37、