雙氫青蒿素對前列腺癌PC-3細(xì)胞體外生長干擾的研究.pdf

1、目的：研究雙氫青蒿素(DHA)對前列腺癌PC-3細(xì)胞的細(xì)胞毒作用以及對細(xì)胞周期和凋亡的影響，探討DHA干擾前列腺癌PC-3細(xì)胞生長的可能機(jī)制。 方法：前列腺癌PC-3細(xì)胞株分為對照組、DHA組和DHA+轉(zhuǎn)鐵蛋白(TF)組。其中對照組分為單純培養(yǎng)基HamF12、TF(25μg/ml)及0.1％二甲基亞砜(DMSO)3個(gè)組，DHA組和DHA+TF組根據(jù)DHA的濃度均分為5個(gè)小組，DHA終濃度分別為12.5，25，50，100，200

2、μmol/L，DHA+TF組中TF濃度均為25μg/ml。采用MTT法檢測各組作用24、48、72小時(shí)后，前列腺癌PC-3細(xì)胞的增殖情況；取對照HamF12組及DHA組、DHA+TF組的12.5，50，200μmol/L濃度組，作用48、72小時(shí)后分別作流式細(xì)胞儀(FCM)細(xì)胞周期、凋亡與壞死的檢測；并對其中48小時(shí)組作SP免疫組化染色，觀察前列腺癌PC-3細(xì)胞內(nèi)Bcl-2、Bax、P53的表達(dá)，對結(jié)果進(jìn)行圖象分析；采用掃描電鏡與透射電

3、鏡觀察DHA(0，12.5，50，200μmol/L)作用前列腺癌PC-3細(xì)胞48小時(shí)后，細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化。 結(jié)果：DHA及DHA+TF對PC-3細(xì)胞的增殖抑制率與DHA濃度和作用時(shí)間相關(guān)(P<0.001)，但DHA與DHA+TF組間比較，沒有顯著差異(P>0.05)，DHA組，DHA濃度最低(12.5μmol/ml)、作用時(shí)間最短(24h)時(shí)抑制率為13.66±20.46％，DHA濃度最高(200μmol/ml)、作用時(shí)間最

4、長(72h)時(shí)，抑制率為78.40±6.79％； DHA+TF組，抑制率最高達(dá)82.64+8.31％。FCM細(xì)胞周期分析顯示DHA與DHA+TF作用PC-3細(xì)胞48小時(shí)后， G<,0>/G<,1>期細(xì)胞比率與DHA濃度呈負(fù)相關(guān)，而各濃度S期細(xì)胞比率變化相對較小，G<,2>/M期細(xì)胞比例與DHA濃度呈正相關(guān)，兩組細(xì)胞周期分布比率沒有明顯差異；與對照組比較，48，72小時(shí)，DHA與DHA+TF組PC-3細(xì)胞的凋亡率與死亡率均有增加，尤其當(dāng)D

5、HA高濃度(200μmol/ml)時(shí)，增幅明顯。免疫組化顯示隨著DHA濃度的增加，DHA及DHA+TF作用48小時(shí)后， Bcl-2在PC-3細(xì)胞漿與細(xì)胞膜內(nèi)的表達(dá)均降低，差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義， Bax胞漿表達(dá)有上調(diào)趨勢，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而P53在對照組與DHA、DHA+TF組均呈陰性表達(dá)。PC-3 細(xì)胞經(jīng)DHA作用后，電鏡下，細(xì)胞表面微絨毛減少和消失，凋亡細(xì)胞可見大小不等、呈杵狀和球狀的突起，細(xì)胞核異染色質(zhì)邊集，細(xì)胞基質(zhì)電子密度變深，線