胰腺癌細(xì)胞MIA PaCa-2趨化因子表達(dá)與CCL25-CCR9促細(xì)胞增殖侵襲的相關(guān)研究.pdf

1、胰腺癌是惡性度極高的惡性腫瘤之一，患者發(fā)現(xiàn)時(shí)多屬晚期，僅有10％-15％有手術(shù)切除的機(jī)會(huì)，5％-7.5％能根治。但是它術(shù)后復(fù)發(fā)率高，預(yù)后差，5年生存率僅為5％左右。胰腺癌的治療面臨如下難題：患者發(fā)現(xiàn)晚，手術(shù)切除幾率小；病情發(fā)展快，易于出現(xiàn)局部浸潤(rùn)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移；對(duì)放化療均不敏感。趨化因子是一類(lèi)促炎多肽細(xì)胞因子的超家族，是能使細(xì)胞發(fā)生趨化運(yùn)動(dòng)的小分子細(xì)胞因子。近年來(lái)，有研究證實(shí)趨化因子能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、侵襲、遷移。但具體哪些趨化因子在胰腺癌

2、發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮作用尚不得知。 研究目的： (1)使用cDNA基因芯片篩選出與胰腺癌細(xì)胞MIA PaCa-2侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的的趨化因子及受體。 (2)采用單克隆抗體阻斷趨化因子及其受體的相互作用，觀察胰腺癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力的變化，在此基礎(chǔ)上明確阻斷趨化因子及其受體相互作用應(yīng)用于臨床防治胰腺癌的可行性。 研究方法： 建立裸鼠的原位胰腺癌模型，將早期與晚期的腫瘤行趨化因子及受體的cDNA芯片檢測(cè)，篩選出

3、在胰腺癌病情發(fā)展中發(fā)揮作用的趨化因子及其受體；再通過(guò)免疫組化，RT-PCR，real-time PCR，Western Blot等方法進(jìn)行驗(yàn)證；另一方面，通過(guò)MTT實(shí)驗(yàn)，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期變化來(lái)驗(yàn)證此趨化因子對(duì)胰腺癌細(xì)胞的促增殖作用，通過(guò)transwell實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證此趨化因子對(duì)胰腺癌細(xì)胞的趨化、促侵襲、促遷移作用，并運(yùn)用此趨化因子受體的單克隆抗體阻斷趨化因子與受體之間的相互作用后，再觀察其對(duì)胰腺癌細(xì)胞上述作用的變化。 研究結(jié)

4、果： (1)建成裸鼠原位胰腺癌模型。 (2)通過(guò)cDNA基因芯片篩選出晚期胰腺癌高表達(dá)的趨化因子及其受體CCL25/CCR9，運(yùn)用免疫組化，RT-PCR，real-time PCR，Western Blot等方法均證實(shí)其在晚期腫瘤標(biāo)本中表達(dá)明顯增強(qiáng)。 (3)證實(shí)CCL25對(duì)胰腺癌細(xì)胞有促增殖，促侵襲，促遷移作用。采用anti-CCR9阻斷后，此種作用明顯減弱。 結(jié)論： 晚期MIA PaCa-2胰腺