基因突變敏感性分子開關在肺癌EGFR基因突變檢測中的應用研究.pdf

1、南華大學碩士學位論文基因突變敏感性分子開關在肺癌EGFR基因突變檢測中的應用研究姓名：肖莉申請學位級別：碩士專業(yè)：藥理學指導教師：李凱廖端芳200705012退火溫度提高而增強。重組質粒定量后，稀釋成108、107、106、105、104、103、102、101拷貝數(shù)l濃度梯度作為陽性模板，顯示敏感性分子開關在普通PCR結合凝膠成像電泳中，15nt缺失突變檢測分子開關可檢測的起始拷貝數(shù)為3000突變分子，而18nt缺失突變檢測分子開關敏

2、感性更高，可檢測的起始拷貝數(shù)為10突變分子。對照組中，采用TaqDNA聚合酶或3’末端無硫代修飾的特異性引物，均易產生假陽性且呈退火溫度依賴性。將上述15nt缺失突變陽性模板用于制定熒光定量PCR的標準曲線，結果顯示，定量曲線循環(huán)閾值與模板濃度具有良好的線性關系，相關系數(shù)為0.990。對6例非小細胞性肺癌患者的肺組織樣本進行檢測，發(fā)現(xiàn)1例含有15nt缺失突變。由于該標本體細胞突變含量較少，低于實際序列分析所檢測范圍的敏感度。結論：結論：