大黃蒽醌類成分的藥代動力學(xué)研究.pdf

1、大黃提取物是從中藥大黃中提取的有效部位，主要含蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚等五種蒽醌類化學(xué)成分。前期研究顯示，大黃提取物可以減輕大鼠腦缺血后腦組織損傷，抗腦缺血損傷和抗血栓形成作用明顯。基于前期研究中大黃提取物在抗腦缺血損傷方面的藥理作用和體內(nèi)分析評價，認(rèn)為大黃蒽醌類成分在急性腦梗死中藥新藥的創(chuàng)制、開發(fā)和應(yīng)用方面具有相當(dāng)?shù)膬?yōu)勢和前景。
　　本文在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，應(yīng)用現(xiàn)代分析方法和手段，以大黃提取物中的蘆薈大黃

2、素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚為指標(biāo)，對大黃蒽醌類成分開展了體內(nèi)藥物分析方法研究和探討，并應(yīng)用于藥代動力學(xué)探索研究中，結(jié)果如下：
　　1.通過條件優(yōu)化，采用固相萃取柱純化生物樣品，以1，8二羥基蒽醌為內(nèi)標(biāo)，采用高效液相色譜法-熒光檢測器建立了生物樣品中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚含量測定方法。結(jié)果顯示，在考察的樣品濃度范圍內(nèi)，均呈良好線性關(guān)系(相關(guān)系數(shù) r>0.99)，高、中、低三個濃度質(zhì)控樣品的日內(nèi)、日

3、間精密度和準(zhǔn)確度 RSD均<10％，被測的五個成分和內(nèi)標(biāo)物的提取回收率均在85%以上，說明所建立的方法靈敏，準(zhǔn)確、可靠，符合生物樣品分析測定的要求。
　　2.單體蒽醌成分在大鼠體內(nèi)的藥物動力學(xué)研究表明，大黃酚、大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素和大黃素甲醚在大鼠體內(nèi)的藥-時曲線均呈現(xiàn)不同程度的雙峰，且隨劑量增高，藥時曲線雙峰現(xiàn)象越加明顯。將五種游離蒽醌成分不同劑量的AUC0-t與 Cmax進(jìn)行相關(guān)和回歸分析，結(jié)果顯示 AUC0-t和 Cm

4、ax與劑量呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，表明在本試驗所用劑量范圍內(nèi)，蘆薈大黃素、大黃素、大黃酚、大黃酸、大黃素甲醚的藥動學(xué)均呈現(xiàn)線性動力學(xué)的特征，為線性動力學(xué)過程，提示這五種成分在大鼠體內(nèi)的分布較廣。
　　3.大黃提取物在正常大鼠體內(nèi)的藥物動力學(xué)研究結(jié)果表明，蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚在正常組大鼠體內(nèi)均呈二室模型,五個成分在大鼠體內(nèi)均表現(xiàn)出吸收快，消除較慢。不同劑量的 AUC0-t與 Cmax相關(guān)回歸分析結(jié)果表明，五種游

5、離蒽醌成分的AUC0-t和Cmax與劑量也呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系。
　　對比分析大鼠和小鼠灌胃相同劑量蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚單體蒽醌與大黃提取物的藥動學(xué)特征，發(fā)現(xiàn)五個蒽醌成分在單體給藥和提取物給藥后，藥動學(xué)參數(shù)有較顯著差異。大黃提取物與單體蒽醌相比，蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚吸收增加，說明此五種成分在生物體內(nèi)存在相互作用。
　　4.與正常組比較，大黃提取物在腦缺血模型組的Cmax、Tmax、CL

6、、Vd、AUC等藥動學(xué)參數(shù)均有顯著性差異(p≤0.05)。腦缺血模型組中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚的血藥濃度均遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于正常組（(p≤0.05)），大黃素甲醚在腦缺血模型組的血藥濃度略小于正常組，說明在腦缺血病理條件下藥物的吸收增加。腦缺血模型組中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚的的tl/2較正常組有延長，說明病理狀態(tài)使其消除減慢，在體內(nèi)滯留時間延長，但無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　5.大黃提取物在大鼠和小鼠中的組織分布

7、研究結(jié)果表明，大黃蒽醌類成分在胃、腸部位的分布濃度最高、吸收相對較慢，肝、腎其次。由于大黃五個蒽醌類成分的極性小，脂溶性高，致其在組織中有一定的滯留，結(jié)果使各組織中的分布濃度均高于血漿。大鼠口服大黃提取物后，主要是以原形藥物從糞便排泄。
　　6.統(tǒng)計分析大黃提取物在大鼠、小鼠和犬體的藥動學(xué)參數(shù)，結(jié)果顯示不同種屬差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。大黃提取物在大鼠、小鼠和犬體內(nèi)有相似的藥代動力學(xué)過程，其吸收均較快，消除較慢。但五種蒽

8、醌類成分在體內(nèi)的的吸收是不同的，其中蘆薈大黃素在大鼠體內(nèi)的Cmax和AUC最高，其次是小鼠，在犬體內(nèi)最低；大黃酸在犬體內(nèi)的Cmax和AUC高于大鼠和小鼠。大黃酚和大黃素甲醚在小鼠與大鼠體內(nèi)的Cmax和AUC均高于犬，而大黃素在三種動物體內(nèi)的吸收無明顯差異性。表明大黃提取物在不同動物間的藥代動力學(xué)特征表現(xiàn)出顯著性差異。
　　本研究建立了大黃蒽醌類成分的體內(nèi)研究分析方法，為大黃蒽醌類提取物的進(jìn)一步開發(fā)提供臨床前藥代動力學(xué)研究資料，并為