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文檔簡介
1、研究背景:
卵裂是指受精卵的分裂,即受精卵進(jìn)行的多次連續(xù)迅速的細(xì)胞分裂,經(jīng)過2細(xì)胞期、4細(xì)胞期、8細(xì)胞期、囊胚期等一系列的過程。在體外輔助生殖技術(shù)中,IVF-ET和ICSI均需要體外受精并卵裂形成胚胎,再將胚胎移植到體內(nèi)繼續(xù)發(fā)育成胎兒。在臨床體外輔助生殖過程中,部分患者多個周期卵子受精后均不能進(jìn)行正常的卵裂,ICSI補(bǔ)救無效,異常的卵裂可停滯在第一次分裂時期、2細(xì)胞胚胎期、4細(xì)胞胚胎期等等。受精卵分裂停滯于第一次分裂時期在
2、人胚胎體外培養(yǎng)過程中較為罕見,目前對于此類受精卵分裂障礙的研究主要集中在受精卵培養(yǎng)環(huán)境、形態(tài)學(xué)研究、細(xì)胞生物學(xué)水平上的研究,尚未有在基因分子遺傳學(xué)水平上的研究報道。Zar1基因是一個卵子特異性表達(dá)的基因,在卵子-胚胎的轉(zhuǎn)化過程中發(fā)揮著重要作用。Zar1基因敲除的雌性小鼠形成的胚胎出現(xiàn)受精卵分裂障礙,原核(PN)可形成,但是母源核和父源核一直相互分離,絕大多數(shù)發(fā)育停滯在單細(xì)胞期,小于20%可進(jìn)入2細(xì)胞期,沒有胚胎可以進(jìn)入4細(xì)胞期。本研究的
3、目的是探究人ZAR1基因變異在人卵裂障礙疾病中的作用。
方法:
收集自2008年9月至2012年10月于山東大學(xué)生殖醫(yī)學(xué)研究中心就診的反復(fù)體外助孕周期發(fā)生受精卵分裂障礙的患者47例(極其罕見),病例的特點(diǎn)是:≧2個周期IVF(第二周期以后均行ICSI)80%以上受精卵不能正常卵裂,受精卵停滯在單細(xì)胞期;激活或科研精子受精均不能啟動正常卵裂;核型:46,XX;平均年齡:32.62歲。
對47例受精
4、卵分裂障礙的患者進(jìn)行外周血ZAR1基因的外顯子及其側(cè)翼序列進(jìn)行測序,采用188例IVF周期中能夠正常卵裂并產(chǎn)下至少一個活胎的婦女作為對照。
結(jié)果:
對47例卵裂障礙患者ZAR1基因測序發(fā)現(xiàn)了1個位于第1外顯子的同義突變(c.516G>A),1個位于第1內(nèi)含子突變(c.964-55T>A),188例正常對照中均不存在。另外,測序還發(fā)現(xiàn)SNP位點(diǎn)rs117545505和rs17609740的基因型頻率與對照組相比
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