小鼠肝干細胞存在的病理學依據及其在肝再生中的作用.pdf

1、在個體發(fā)育中,細胞有分化等級差異——從受精卵、胚胎干細胞、各級多能干細胞到有成熟結構和功能的各組織、器官的細胞.個體發(fā)育完成后是否某些等級的干細胞仍存留于個體的組織器官中呢?生命歷程中,組織器官不可避免地經歷生理性或病理性細胞丟失和再生.存留于造血系統、表皮和腸上皮中的干細胞在這種再生中發(fā)揮了關鍵作用.肝臟中又是什么情況昵?為此,該研究針對上述問題展開工作,主要方法、結果和結論概述如下:1.得到C57小鼠不同來源的肝干細胞候選細胞:骨髓

2、細胞(BMC)、胎肝源上皮樣集落形成細胞(FECFC)和兩種肝內源性成體肝上皮樣集落形成細胞(LEPCs和HECFC).細胞體外誘導分化、回輸體內脾結節(jié)形成實驗和受體內衍生于骨髓供體細胞的Mx-Cre和sry的檢測(免疫組化和PCR),表明:這幾種來源(骨髓源、胎肝源、成體肝內源)的細胞具備肝干細胞特性.另發(fā)現肝損傷還能使骨髓源脾結節(jié)細胞肝膽標志表達增強.2.病理觀察肝再生中肝/膽管細胞、OVC和肝細胞源大核分裂相及肝干細胞源小核分裂相

3、,發(fā)現:1)RS/PH組:小核分裂相所反映的內外源肝干細胞(包括OVC)可能是肝重建的決定因素,其中竇板交界處小核分裂相可能是骨髓源肝干細胞參與肝重建的形態(tài)學證據;2)RS組14天后小核分裂相逐步增多,可能反映了內外源肝干細胞在肝細胞更新中的作用;3)大小核分裂相所反映的肝細胞與肝干細胞可能不僅是單純PH組肝重建的共同決定因素,而且可能共同參與了正常對照組和假手術組肝細胞的更新.結合上述結果和相關報道,提出了肝流域假說——肝內源性成體肝

4、干細胞存在于小膽管/COH附近,其能復制、產生子代(由OVC經小肝細胞)向肝細胞分化;不同分化等級的細胞從小膽管/COH附近流經肝板匯向中央靜脈,形成該流域干流;由血循環(huán)路過的外源性干細胞在干流不同的部位分裂增殖、部分轉分化為肝系細胞,作為支流匯入干流.生理性肝細胞更新和病理性肝重建實際上是肝流域中三種成分(位于小膽管/COH附近的肝干細胞/OVC,有有限增殖潛能的成熟肝細胞和外源性干細胞)共同對肝再生信號作出反應的結果.3.肝內源性成