清熱養(yǎng)心顆粒藥代特性研究.pdf

1、清熱養(yǎng)心顆粒是江蘇省中醫(yī)院制劑，主要由金銀花、黃連、甘草、百合等組成，具有清熱解毒、養(yǎng)心安神之功效，臨床主要用于病毒性心肌炎等的治療。
　　清熱養(yǎng)心顆粒在臨床上療效明確、廣泛應(yīng)用，但其相關(guān)研究甚少。目前多是進(jìn)行藥理作用和臨床應(yīng)用方面的研究，其藥代特性方面的研究較為匱乏。本文試圖在本課題組前期工作及文獻(xiàn)總結(jié)基礎(chǔ)上對(duì)清熱養(yǎng)心顆粒的藥代特性進(jìn)行研究，旨在為臨床用藥、后續(xù)的科研研究及制劑研發(fā)提供參考依據(jù)。建立同時(shí)測(cè)定清熱養(yǎng)心顆粒中綠原酸、

2、咖啡酸、甘草次酸、氧化苦參堿、薯蕷皂苷元成分含量的方法。采用LC-MS聯(lián)用方法，結(jié)果顯示:綠原酸、咖啡酸、甘草次酸、薯蕷皂苷元和氧化苦參堿線性范圍分別為11.60～2970(r=0.9986),3.05～780(r=0.9958),1.10～282(r=0.9991),3.63～930(r=0.9931),0.47～120μg·L-1(r=0.9977)。本法專屬性強(qiáng)、快速靈敏、可用于清熱養(yǎng)心顆粒中綠原酸、咖啡酸、甘草次酸、氧化苦參堿、

3、薯蕷皂苷元成分的含量測(cè)定。
　　研究清熱養(yǎng)心顆粒中綠原酸在大鼠、比格犬和人的血漿蛋白結(jié)合率。采用血漿平衡透析法，以高效液相色譜法對(duì)透析內(nèi)液與外液中綠原酸的含量進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算綠原酸與大鼠、比格犬和人的血漿蛋白結(jié)合率。綠原酸低中高3個(gè)濃度的大鼠血漿蛋白結(jié)合率分別為45.4±2.7％、47.7±3.0％、45.8±1.6％;比格犬血漿蛋白結(jié)合率分別為40.3±2.1％、42.6±1.8％、42.9±2.3％;人血漿蛋白結(jié)合率分別為54.

4、3±2.0％、50.2±2.5％、52.1±3.1％。綠原酸與血漿蛋白具有中等強(qiáng)度的結(jié)合，其中與人血漿中的蛋白結(jié)合較強(qiáng)，且人＞大鼠＞比格犬。
　　建立大鼠血漿中咖啡酸、綠原酸的UPLC-MS/MS測(cè)定方法，并用于其在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究。SD大鼠6只，灌胃清熱養(yǎng)心顆粒2 g·kg-1，以阿魏酸為內(nèi)標(biāo)，用UPLC-MS/MS法測(cè)定給藥后血漿中的藥物濃度，并用DAS1.0軟件計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)?？Х人帷⒕G原酸的線性范圍分別為25～80

5、0 ng· mL1(r=0.9965)、11.25～1440 ng·mL-1(r=0.9949)。方法學(xué)考察均符合要求。日內(nèi)、日間變異系數(shù)(RSD)均小于9.8％，精密度和準(zhǔn)確度等均符合生物樣品分析的要求。大鼠體中咖啡酸藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù):T1/2β為(180.42±25.54) min，AUC0-t為(155397.53±3059.14) ng·min·mL-1，Cmax為(729.43±24.56) ng·mL-1;綠原酸藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)

6、:T1/2β為(115.94±16.12) min，AUC0-t為(191710.99±7263.26) ng·min·mL-1，Cmax為(1110.32±115.33) ng·mL-1。建立的UPLC-MS/MS分析方法準(zhǔn)確靈敏，適于咖啡酸，綠原酸的藥代動(dòng)力學(xué)研究。
　　采用Cocktail探針?biāo)幬锓ㄔu(píng)價(jià)清熱養(yǎng)心顆粒對(duì)大鼠體內(nèi)5種CYP450亞型酶活性的影響，為臨床聯(lián)合用藥時(shí)考察相互作用提供依據(jù)。分別選用甲苯磺丁脲、氯唑沙宗、

7、茶堿、奧美拉唑及右美沙芬作為CYP2C9、CYP2E1、CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6的探針底物。大鼠灌胃清熱養(yǎng)心顆粒4 g·kg-1，連續(xù)給藥14 d。采用LC-MS/MS測(cè)定實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組大鼠體內(nèi)5種混合探針的血藥濃度，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。清熱養(yǎng)心顆粒連續(xù)給藥14d后，與對(duì)照組相比，甲苯磺丁脲和茶堿的代謝明顯加快，氯唑沙宗、奧美拉唑和右美沙芬的代謝無(wú)顯著性差異。清熱養(yǎng)心顆粒對(duì)大鼠體內(nèi)CYP2C9、CYP1A2酶有誘導(dǎo)作用，而