異丙酚對LPS誘導人肺微血管內皮細胞ACE的表達與活性的影響.pdf

1、目的: 在脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）誘導的人肺微血管內皮細胞(humanpulmonary microvascular endothelial cells，HPMVCs)損傷模型中，觀察異丙酚預處理對HPMVCs血管緊張素轉化酶(angiotensin-converting enzyme，ACE)活性和基因表達的影響，以及其對炎癥因子表達的調節(jié)，以探討異丙酚肺保護作用的可能機制。
　　方法: 以體外培養(yǎng)

2、的HPMVCs作為實驗對象，將細胞隨機分為四組(n=8):溶劑對照組（C組）、單純異丙酚處理組（P組）、LPS誘導組（L組）和異丙酚預處理組（P+L組）。各藥物終濃度:LPS5μg/ml，異丙酚50μM。按上述分組，異丙酚預處理組在加入LPS前1h加入異丙酚。各處理組細胞分別培養(yǎng)12h、24h、48h、72h后采用CCK-8法測細胞活力。細胞孵育12h后，采用改良分光光度法檢測各組培養(yǎng)液和細胞中的ACE活性，熒光定量PCR檢測ACE、T

3、NF-α、IL-1β和MCP-1 mRNA表達水平，同時用ELISA法測定細胞培養(yǎng)液中TNF-α、IL-1β和MCP-1的蛋白含量。
　　結果: (1)各組細胞在各時間點的細胞活力無顯著性差異(P＞0.05);(2)與C組相比，P組各檢測指標均無顯著性差別(P＞0.05); L組TNF-α、IL-1β和MCP-1的蛋白含量及基因表達水平均顯著升高，培養(yǎng)液中ACE活性增加，細胞ACE活性降低，ACE mRNA表達下調(P＜0.05)