SOCS3對(duì)肺腺癌細(xì)胞株生長和轉(zhuǎn)移的影響及相關(guān)信號(hào)通路的研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文SOCS3對(duì)肺腺癌細(xì)胞株生長和轉(zhuǎn)移的影響及相關(guān)信號(hào)通路的研究姓名：余祖濱申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)（胸心外）指導(dǎo)教師：肖穎彬20080501第三軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文5、Westernblot法檢測SOCS3對(duì)STAT3、Erkl／2、Akt信號(hào)分子活性的影響及細(xì)胞周期蛋f芻(cyclinDl、p21)的表達(dá)變化；半定量RTPCR和明膠酶譜分析檢測SOCS3對(duì)基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP2、9)表達(dá)和活性的影響。結(jié)果

2、：1、肺腺癌細(xì)胞株A549、SPC—A1在常規(guī)培養(yǎng)條件幾乎檢測不到SOCS3基因表達(dá)。2、轉(zhuǎn)染細(xì)胞經(jīng)G418篩選后獲得SOCS3穩(wěn)定表達(dá)肺腺癌細(xì)胞株；RTPCR和免疫熒光檢測證實(shí)SOCS3基因轉(zhuǎn)染組細(xì)胞中SOCS3mRNA和蛋白水平均有表達(dá)。3、SOCS3穩(wěn)定表達(dá)A549和SPC—A1細(xì)胞克隆形成抑制率分別為738％和559％。SOCS3穩(wěn)定表達(dá)A549細(xì)胞的倍增時(shí)間(64516h)較對(duì)照組(49209h)明顯延長(P001)。SPC—

3、A1細(xì)胞也取得了相似的結(jié)果(56915hvs44810h，P001)。4、化療藥物敏感性檢測發(fā)現(xiàn)，SOCS3可將A549細(xì)胞對(duì)順鉑、阿霉素、紫杉醇的敏感性分別提高31、39、73倍；而SOCS3可將SPC—A1細(xì)胞對(duì)順鉑、阿霉素、紫杉醇的敏感性分別提高34、34、64倍。5、與對(duì)照組相比，SOCS3穩(wěn)定表達(dá)A549和SPC—A1細(xì)胞移植瘤生長緩慢，瘤重顯著降低(O33_0089VS106_0139inA549；128_0319vJ296

4、_0699inSPC—A1；P001)；A549和SPC—A1移植瘤模型的抑瘤率分別為689％和568％。6、細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，SOCS3穩(wěn)定表達(dá)A549細(xì)胞在Matrigel及FN上粘附率(41222％和38846％)，較對(duì)照組(73581％和66865％)顯著降低(PO01)；SOCS3穩(wěn)定表達(dá)SPCA1細(xì)胞在Matrigel及FN上粘附率分別為(37235％和39642％)，較對(duì)照組(63946％和56453％)顯著降低(PO

5、01)。細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示SOCS3穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞在培養(yǎng)18h穿膜細(xì)胞數(shù)為19321(A549)和23452(SPC—A1)，較對(duì)照組41735(A549)和47765(SPCA1)顯著減少(PO01)。細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示48h后SOCS3穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞穿膜細(xì)胞數(shù)分別為12325(A549)和14744(SPC—A1)，均較對(duì)照組23O40(A549)(P005)和34554(SPCA1)(P001)顯著減少。7、在常規(guī)培養(yǎng)條件下，與對(duì)