髓鞘堿性蛋白免疫表位肽誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞與神經(jīng)元細(xì)胞的相互作用研究.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)旨在體外研究觀察MBP誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞能否直接作用于人腦神經(jīng)元細(xì)胞,使神經(jīng)細(xì)胞變性壞死;如有直接損害作用,那么鑒定CD4+細(xì)胞、CD8+細(xì)胞、NK細(xì)胞等T細(xì)胞亞群到底那種更起到明顯的直接損害作用;檢測(cè)對(duì)神經(jīng)元和髓鞘直接作用的MBP誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞亞群有無(wú)不同,以便進(jìn)一步探討MS發(fā)病的細(xì)胞學(xué)機(jī)制.首先合成MBP免疫優(yōu)勢(shì)表位肽段83-ENPVVHFFKNIVTPRTP-99肽段;用MTT法測(cè)定MBP合成肽的淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率并找到其合適的工作

2、濃度;流式細(xì)胞儀測(cè)定MBP合成肽誘導(dǎo)T細(xì)胞亞群的變化;用MBP合成肽誘導(dǎo)培養(yǎng)的淋巴細(xì)胞與人腦神經(jīng)元細(xì)胞共同混合培養(yǎng),進(jìn)行了掃描電鏡觀察,以發(fā)現(xiàn)MBP特異性淋巴細(xì)胞對(duì)神經(jīng)細(xì)胞和髓鞘有無(wú)明顯的聚集、黏附和攻擊作用,神經(jīng)元和髓鞘有無(wú)損傷;最后用CD分子熒光單克隆抗體染色方法,鑒定作用于神經(jīng)元和髓鞘的MBP特異性T細(xì)胞的亞群種類,以便明確CD4+、CD8+細(xì)胞和自然殺傷T細(xì)胞(NK細(xì)胞)中,哪一個(gè)亞群起到更明顯的直接作用,并比較作用于神經(jīng)元和髓