醛固酮、血管緊張素Ⅱ?qū)Ω涡菭罴?xì)胞作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、最近研究提示肝臟中亦存在組織RAAS,RAAS同樣參與了肝纖維化的發(fā)生發(fā)展過程.該實(shí)驗(yàn)觀察了RAAS主要活性成分醛固酮和血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)對HSC細(xì)胞株HSC-T6膠原合成與代謝的影響,以進(jìn)一步闡明RAAS參與肝纖維化形成的具體成分和作用機(jī)制,為拮抗RAAS活性的抗肝纖維化治療選擇作用靶點(diǎn).方法:HSC-T6細(xì)胞用含10﹪胎牛血清的DMEM高糖培養(yǎng)液接種于培養(yǎng)皿中,在含5﹪CO<,2>、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),MTT比色觀察細(xì)胞增殖,

2、<'3>H-脯氨酸摻入觀察細(xì)胞膠原合成.不同濃度醛固酮或AngⅡ(10<'-6>~10<'-9>mol/l)作用細(xì)胞48小時后,提取細(xì)胞RNA,RT-PCR檢測各組α1(Ⅰ)、α1 (Ⅲ)前膠原、TIMP-1mRNA表達(dá)情況.提取細(xì)胞蛋白質(zhì),Westernblot檢測各組Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白的表達(dá).結(jié)論:醛固酮可以直接促進(jìn)HSC的膠原合成和TIMP-1mRMA的表達(dá).AngⅡ可以直接促進(jìn)HSC的TIMP-1mRNA的表達(dá),但對HSC α1(