雌二醇抑制人成骨樣細(xì)胞MG-63外向電壓門控鉀通道電流.pdf

1、目的:先前的研究已經(jīng)表明,雌二醇(E2)可通過阻斷幾種類型細(xì)胞(如心肌細(xì)胞和神經(jīng)元細(xì)胞)的電壓門控鉀離子通道(Kv)而發(fā)揮重要功能。在成骨細(xì)胞也能檢測到Kv電流,但是E2對成骨細(xì)胞的此種電流的作用尚不清楚。
　　方法:通過膜片鉗技術(shù)檢測E2作用前和作用后的人成骨樣細(xì)胞MG-63中Kv電流變化,分析E2對I-V曲線、激活曲線以及滅活曲線的作用。通過RT-PCR分析MG-63細(xì)胞Kv亞型的表達(dá)。通過質(zhì)粒轉(zhuǎn)染技術(shù)和膜片鉗技術(shù)檢測E2對K

2、v2.1電流的作用。
　　結(jié)果:我們發(fā)現(xiàn),E2可抑制MG-63細(xì)胞中Kv電流的峰值和尾值,半抑制濃度分別為480nM和325nM。為闡明此抑制作用的機(jī)制,我們檢測了E2對Kv電流通道動力學(xué)的作用。應(yīng)用500nME2使Kv的半最大激活電位(V1/2)從1.3mV向左移至-4.4mV,使半最大滅活電位從-55mV向左輕微移至-58.2mV。為確定MG-63中Kv電流的分子基礎(chǔ),我們通過RT-PCR進(jìn)行了分析,結(jié)果表明Kv2.1表達(dá)明顯