牽張力和Apelin單獨或聯(lián)合作用對MG-63成骨樣細(xì)胞增殖和分化的影響.pdf

1、目的：探討牽張力和Apelin單獨或聯(lián)合作用對MG-63成骨樣細(xì)胞增殖分化的影響。
　　 方法：取人成骨肉瘤MG-63細(xì)胞株復(fù)蘇、培養(yǎng)備用。采用根據(jù)四點彎曲加力原理設(shè)計的細(xì)胞加力裝置，加張應(yīng)力，大小分別為0、1000、2000、4000、6000μstrain。在培養(yǎng)基中加或不加0-100nM的Apelin。對不同力值、不同時點、加或不加Apelin的MG-63細(xì)胞進行分組。然后分別用α-磷酸奈酚法測定細(xì)胞內(nèi)的堿性磷酸酶活性(A

2、LP);ELISA試劑盒測定釋放至培養(yǎng)基中的前膠原IC-端前肽(PICP)，檢測I型膠原的表達(dá)；[3H]胸腺嘧啶摻入法對細(xì)胞增殖進行檢測。
　　 結(jié)果：當(dāng)應(yīng)變值為2000μstrain時，牽張力對MG-63成骨樣細(xì)胞ALP活性、I型膠原分泌和[3H]胸腺嘧啶的表達(dá)的促進作用最強。12h內(nèi)牽張力呈時間依賴性上調(diào)ALP活性，之后緩慢下降；18h內(nèi)牽張力呈時間依賴性促進I型膠原分泌，之后緩慢減少。Apelin對MG-63成骨樣細(xì)胞的A

3、LP活性和I型膠原分泌無影響。不同濃度的Apelin可以促進[3H]胸腺嘧啶的表達(dá)，1nMApelin可起到顯著促進作用。當(dāng)應(yīng)變?yōu)?000μstrain時加力3h時，加不同濃度的Apelin，ALP的活性和1型膠原的分泌與單純加力組相比無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，而[3H]胸腺嘧啶的表達(dá)與單純加Apelin組相比顯著增加，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：適宜的牽張力刺激可以促進MG-63成骨樣細(xì)胞的增殖分化，Ape