胰腺癌細胞抵抗吉西他濱誘導的細胞死亡的機制研究.pdf

1、胰腺癌是死亡率最高的惡性腫瘤之一，胰腺癌的致死性主要是由于其化療藥物抵抗能力，這與胰腺癌細胞死亡信號通路的改變密切相關。以往大家普遍認為腫瘤細胞化療耐藥的機制一般為對細胞凋亡的抵抗，細胞凋亡的抵抗機制一直是研究的熱門話題。然而越來越多的證據(jù)表明，腫瘤細胞死亡方式呈現(xiàn)多樣化。深入理解化療藥物誘導的腫瘤細胞死亡形式及信號通路的變化對于腫瘤化療耐藥的克服及藥靶的開發(fā)具有非常重要的現(xiàn)實意義。
　　程序性壞死是近幾年發(fā)現(xiàn)的另一種程序性細胞死

2、亡形式，與凋亡相似，是可調控的細胞死亡形式。一般在凋亡信號通路受到阻斷，caspase活性受到抑制的條件下發(fā)生，這一特質也恰恰使程序性壞死具有了克服腫瘤化療耐藥的潛質，而且使得程序性壞死在耐藥方面的研究成為熱點。但是，程序性壞死在傳統(tǒng)化療藥物誘導的腫瘤細胞死亡抵抗中是否發(fā)揮作用，凋亡和程序性壞死在腫瘤細胞死亡抵抗中發(fā)揮怎樣的作用，調控腫瘤細胞死亡形式及死亡抵抗的關鍵分子有哪些還不明確，本研究就是要針對這些問題進行初步探究。
　　在

3、本研究中，我們首先分析了168例胰腺癌病人樣本，發(fā)現(xiàn)RIP3的表達水平與胰腺癌病人的總體生存時間顯著相關，RIP3高表達是胰腺癌病人死亡的危險因素。然后我們在細胞水平進行了研究，我們篩選出能夠發(fā)生程序性壞死的胰腺癌細胞株CFPAC-1，我們發(fā)現(xiàn)吉西他濱誘導該細胞的死亡不會被全caspase抑制劑Z-VAD-fmk阻斷，卻能夠被程序性壞死抑制劑 Nec-1部分阻斷，且透射電鏡結果顯示，吉西他濱能夠誘導CFPAC-1發(fā)生凋亡和壞死，。我們用

4、吉西他濱誘導CFPAC-1細胞獲得了IC50為20μM的耐藥細胞株R1、R2。另外，我們發(fā)現(xiàn)該耐藥細胞株獲得了抵抗凋亡和程序性壞死的能力。我們首次在腫瘤耐藥模型中研究了程序性壞死的作用。我們發(fā)現(xiàn)在胰腺癌耐藥細胞株中，RIP3、CD147、p-Drp1的表達水平顯著上調。干涉RIP3能夠促進吉西他濱誘導的耐藥腫瘤細胞的死亡，對CFPAC-1細胞沒有顯著作用。另外，干涉CD147或者利用CD147的單克隆抗體Hab18/6H8阻斷聯(lián)合吉西他