miRNA在吉西他濱耐藥的胰腺癌患者血漿中及胰腺癌患者血漿中表達的初步研究.pdf

1、胰腺癌的起病隱匿、死亡率高、預(yù)后差，其中位生存期僅為6個月。造成胰腺癌預(yù)后差的主要原因包括胰腺癌的早期診斷率低、化療耐藥率高等。胰腺癌缺少大規(guī)模篩查方法，早期診斷率低，大部分患者在出現(xiàn)癥狀就診時，已失去最佳手術(shù)機會。對于無法手術(shù)的患者，化療是其首選治療方案。其中，又以吉西他濱為其一線化療藥物在臨床上廣泛使用。但是，胰腺癌患者易對吉西他濱產(chǎn)生耐藥性，導(dǎo)致藥物的敏感性下降，因而嚴重影響了化療的療效。尋找簡單方便的胰腺癌篩查方法，提高早期胰腺

2、癌的診斷率，并且降低或逆轉(zhuǎn)胰腺癌對吉西他濱化療的耐藥性，是目前亟待解決的問題。
　　microRNA(miRNA)是一類非編碼的單鏈RNA，其長度在19-24個核苷酸之間，其不僅存在于組織細胞中，也廣泛存在于外周循環(huán)血中。miRNA可以通過與靶mRNA的尾端非編碼區(qū)相結(jié)合，抑制mRNA的翻譯或者對靶mRNA進行降解，以此調(diào)節(jié)功能性蛋白的表達水平，進而參與人體的多種生理以及病理過程。既往研究表明，miRNA在多種腫瘤組織及血漿中中呈

3、現(xiàn)出表達量的異常改變，提示其與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及對化療藥物的耐藥性存在一定的相關(guān)性。通過研究miRNA在胰腺癌患者、以及對吉西他濱耐藥的胰腺癌患者體內(nèi)特異性的表達譜，可以為提高胰腺癌的早期診斷率、增加胰腺癌對吉西他濱的敏感性、進而提高胰腺癌的生存期提供新的思路。
　　第一部分胰腺癌吉西他濱耐藥患者特異性循環(huán)miRNA的篩選
　　目的：檢測對吉西他濱耐藥的胰腺癌患者血漿中表達呈現(xiàn)明顯異常的microRNA，為尋找新的生物標志

4、物用于胰腺癌的用藥指導(dǎo)和吉西他濱的療效預(yù)測提供新的思路。
　　方法：收集對吉西他濱耐藥的胰腺癌患者血漿，抽提血漿RNA，采用qPCR方法檢測并篩選出對吉西他濱耐藥的胰腺癌患者血漿中相比于對吉西他濱不耐藥的胰腺癌患者表達差異明顯的microRNA。
　　結(jié)果：對吉西他濱耐藥的胰腺癌患者相較于不耐藥患者存在表達差異的microRNA有24個，其中6個下調(diào)（miR-3145-5p，miR-214、miR-4328、miR-7、mi

5、R-3907及miR-639），18個上調(diào)（miR-323-3p，miR-450a、miR-301b、miR-655、miR-340#、miR-369-5p、miR-656、miR-224、miR-544、miR-32、miR-433、miR-361-3p、miR-199b-5p、miR-548a-3p、miR-551b、miR-154及miR-3182）。
　　結(jié)論：胰腺癌患者中對吉西他濱耐藥和不耐藥者血漿microRNA存在較

6、顯著差異，其有可能作為一種潛在的分子標志物預(yù)測吉西他濱在胰腺癌化療過程中的療效。
　　第二部分胰腺癌患者特異性循環(huán)miRNA的篩選
　　目的：檢測胰腺癌患者血漿中表達差異的microRNA，為尋求新的分子標志物用于胰腺癌的無創(chuàng)性診斷提供理論依據(jù)。
　　方法：收集胰腺癌患者血漿，抽提血漿RNA，采用qPCR方法檢測并篩選出胰腺癌患者血漿中相比于正常人表達呈現(xiàn)明顯差異的microRNA。
　　結(jié)果：胰腺癌患者相較于健

7、康人存在表達差異的microRNA共28個，其中25個下調(diào)（miR-7，miR-155，miR-204，miR-1260b，miR-1228，miR-10b，miR-1281，m m m結(jié)果：胰腺癌患者相較于健康人存在表達差異的microRNA共28個，其中25個下調(diào)（miR-7，miR-155，miR-204，miR-1260b，miR-1228，miR-10b，miR-1281，iR-3187，miR-3907，miR-3619，m

8、iR-4274，miR-4328，miR-3145-5p，miR-497，iR-214，miR-4728-3p，miR-718，miR-4785，miR-4669，miR-636，miR-4687-5p，iR-638，miR-639，miR-941，miR-874），3個上調(diào)（miR-32，miR-3182和miR-625#）。
　　結(jié)論：胰腺癌患者血漿中microRNA表達與正常人群有較顯著的差異，其有可能成為幫助胰腺癌早期診斷