吉西他濱水凝膠的設(shè)計(jì)合成及其在胰腺癌的抗癌效果研究.pdf

1、目的和內(nèi)容：
　　以吉西他濱為基礎(chǔ)聯(lián)合其他化療藥物（如白蛋白紫杉醇、替吉奧等）是胰腺癌化療的一線方案，但包括吉西他濱及其他多數(shù)化療藥物都普遍存在水溶性差，無選擇殺傷，毒副作用大，有效率低等問題。為了提高吉西他濱水溶性，減少毒副作用，聚合物膠束及聚合物納米粒等納米載體的應(yīng)用目前正在被廣泛研究，但以上這類載體在應(yīng)用上都存在著藥物包載率低，制備相對(duì)困難等問題。目前在藥物控釋、細(xì)胞培養(yǎng)和再生醫(yī)學(xué)等方面小分子多肽水凝膠具有廣泛的應(yīng)用前景，其

2、可以作為疏水性藥物的載體，在提高藥物水溶性的同時(shí)也能更加有效的將藥物靶向作用于癌細(xì)胞和腫瘤組織。本文旨在通過將吉西他濱與小分子多肽結(jié)合制成吉西他濱載藥小分子水凝膠，達(dá)到荷載藥物的目的，并且通過化學(xué)反應(yīng)和酶促反應(yīng)達(dá)到藥物緩釋的目的，提高吉西他濱對(duì)胰腺癌腫瘤細(xì)胞的抗癌活性，使其成為一種新的吉西他濱藥物傳輸體系，在將來的臨床研究中得到廣泛的應(yīng)用。
　　方法：
　　1.小分子多肽鏈的合成與表征：采用多肽固相合成法合成4條小分子多肽鏈

3、；GFFYGRGD、GFFYGRGE、FBA–GFFYGRGD、FBA–GFFYGRGE；通過反相高效液相色譜（RP-HPLC）分離提純小分子多肽；運(yùn)用核磁分析手段和液相色譜-質(zhì)譜連用來確定小分子多肽鏈的結(jié)構(gòu)。
　　2.吉西他濱載藥小分子水凝膠的制備與表征：通過吉西他濱與多肽發(fā)生席夫堿反應(yīng)制備合成吉西他濱載藥小分子水凝膠；通過流變學(xué)實(shí)驗(yàn)研究吉西他濱藥載小分子水凝膠的力學(xué)強(qiáng)度；運(yùn)用透射電鏡觀察研究吉西他濱載藥小分子多肽水凝膠的微觀納

4、米形態(tài)特性；通過體外藥物釋放實(shí)驗(yàn)研究在不同 PH值的環(huán)境下，水凝膠對(duì)吉西他濱釋放速率的影響。
　　3.吉西他濱載藥小分子多肽體系的體外抗癌活性研究：通過MTT實(shí)驗(yàn)研究對(duì)比單純的吉西他濱與吉西他濱-多肽共軛物對(duì)三種胰腺癌細(xì)胞系的毒性效果，驗(yàn)證該吉西他濱-多肽體系的抗腫瘤效果。
　　結(jié)果：
　　1.采用多肽固相合成法合成的小分子多肽鏈的粗產(chǎn)品產(chǎn)率約達(dá)90％，經(jīng)過反相高效液相色譜（RP-HPLC）分離提純后，小分子多肽純度得

5、以提高，達(dá)到95%以上。
　　2.小分子多肽中的醛基（羰基）與吉西他濱分子中的的氨基發(fā)生席夫堿反應(yīng)結(jié)合形成小分子多肽水凝膠，可以保護(hù)吉西他濱結(jié)構(gòu)中的氨基，從而變相的提高吉西他濱的血藥濃度，同時(shí)增加吉西他濱的水溶性，降低吉西他濱的外周毒性；流變實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明：吉西他濱載藥小分子水凝膠具有較好的抗壓力和抗剪切力；透射電鏡實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：在凝膠過程中，通過希夫堿反應(yīng)，納米纖維結(jié)構(gòu)加長(zhǎng)、增粗、膠連效果明顯并形成致密的凝膠網(wǎng)絡(luò)體系；體外藥物釋放

6、實(shí)驗(yàn)表明，當(dāng)PH值低于6.5時(shí)，即在酸性環(huán)境下，水凝膠中的吉西他濱與小分子多肽中的醛基完全解離，將吉西他濱釋放。
　　3. MTT實(shí)驗(yàn)表明：與單純的吉西他濱相比，吉西他濱-多肽共軛物增強(qiáng)了藥物對(duì)胰腺癌的細(xì)胞毒性作用。
　　結(jié)論：
　　1.吉西他濱可以與含有醛基（羰基）的多肽鏈發(fā)生席夫堿反應(yīng)結(jié)合形成小分子多肽水凝膠，保護(hù)吉西他濱結(jié)構(gòu)中的氨基，有效的提高了吉西他濱的藥物包載率和溶解性。
　　2.超分子納米纖維和水凝膠