肝癌組織hugl-1異常剪接體的功能的研究.pdf

1、細胞極性是指細胞內的形態(tài)、蛋白質的分布以及功能等的不對稱性，是有機體行使各種正常生理功能（細胞的不對稱性分裂、細胞的遷移、細胞的免疫、神經信號的傳導等）重要基礎。細胞極性的建立和維持對于胚胎和個體發(fā)育的過程是必需的，在病理條件下，丟失細胞極性會嚴重危害機體發(fā)揮正常功能形成腫瘤并且發(fā)生轉移。
　　 在果蠅體內發(fā)現的第一個抑癌蛋白Lethalgiantlarvae(Lgl)，在建立細胞極性過程中發(fā)揮了重要的功能。Lgl在進化上具有很

2、高的保守性，高等哺乳動物的同源蛋白mLgl也參與調節(jié)細胞極性，大量深入研究結果顯示1gl的同源基因hugl-1，也起到抑癌基因的功能。Hugl-1在在多種常見的人類癌癥例如，乳腺癌、肺癌、子宮內膜癌、結腸癌以及黑色素瘤中被發(fā)現蛋白表達量的下調，而且結腸癌淋巴結的轉移與Hugl-1蛋白表達下調相關，暗示了Hugl-1可能參與了腫瘤細胞的轉移過程。為了研究Hugl-1在癌癥中與肝癌發(fā)牛發(fā)展的相互關系，蘆雪峰等研究人員通過對80對肝癌組織和5

3、株肝癌細胞株的hugl-1基因組序列和mRNA序列比對分析發(fā)現32.5％(26/80)的肝癌組織及20.0％(1/5)的肝癌細胞株發(fā)牛了頻繁的異常剪輯，但是在對應的癌旁肝組織中并沒有發(fā)現這些變化。蘆雪峰等克隆并且表達了2個具有代表性的Hugl-1突變體Hugl-1/△1414-1567/1667-1959和Hugl-1/△1190-1508能夠干擾內源的Hugl-1的牛理功能（對肝癌細胞遷移和浸潤具有促進作用，明顯提高肝癌細胞在裸鼠體內

4、的成瘤的能力;野牛型的Hugl-1起到相反的作用）。但是Hugl-1是如何在肝癌的發(fā)生發(fā)展中的機理目前還不清楚。
　　 為了進一步了解Hugl-1在癌癥發(fā)生發(fā)展中的作用，本論文成功的建立了研究細胞極性蛋白Hugl-1功能的Tet-On Advanced Inducible Gene Expression System以及建立了可誘導的三維培養(yǎng)MDCKⅡ細胞的系統(tǒng)。結果表明:在二維培養(yǎng)條件下，誘導表達Hugl-1的2個突變體Hug

5、l-1/△1414-1567/1667-1959和Hugl-1/△1190-1508能夠促進MDCKⅡ細胞遷移，野牛型的Hugl-1/wt抑制MDCKⅡ細胞的遷移，說明Hugl-1不儀在肝癌細胞中起到抑癌基因的作用在MDCKⅡ細胞中也起到類似的功能，具有普遍的意義;在二維培養(yǎng)條件下，無論是突變體還是野生型的Hugl-1分布在胞漿和細胞膜上;三維培養(yǎng)條件下，Hugl-1的2個突變體Hugl-1/△1414-1567/1667-1959和H