FK506處理的供者樹突狀細(xì)胞在誘導(dǎo)大鼠同種移植免疫耐受中的作用.pdf

1、目的：研究FK506處理的供者未成熟樹突狀細(xì)胞(immature dendritic cell，imDC)對(duì)大鼠同種異體器官移植免疫耐受的影響，探討imDC誘導(dǎo)免疫耐受的機(jī)制。 方法：聯(lián)合應(yīng)用低劑量重組大鼠GM-CSF(1.5ng/ml)和IL-4(4 ng/ml)誘導(dǎo)Wistar大鼠骨髓細(xì)胞，培養(yǎng)出大量未成熟樹突狀細(xì)胞(imDC)，并分別用LPS和FK506加以處理，利用形態(tài)學(xué)及FCM鑒定其成熟度。將SD大鼠分為3組：第1組為

2、對(duì)照組，術(shù)前7天尾靜脈注射生理鹽水1.0ml；第2組為未經(jīng)FK506處理組，術(shù)前7天尾靜脈注射未經(jīng)FK506處理的imDC 2×10<'6>(1.0ml)；第3組為FK506處理組，術(shù)前7天注射FK506處理的imDC 2×10<'6>(1.0m].)。以Wistar大鼠為供體，SD大鼠為受體，行頸部心臟移植，觀察移植心臟存活時(shí)間、移植后大鼠與Wistar大鼠及第三品系Lewis大鼠單向MLR、心肌病理及血清IL-2、IL-4、IL-1

3、0、IFN-r的水平變化。 結(jié)果：1、流式細(xì)胞儀分析結(jié)果顯示所培養(yǎng)的細(xì)胞表面低表達(dá)CD80、CD86，LPS的刺激使這些分子表達(dá)明顯上調(diào)，因此確定所培養(yǎng)的細(xì)胞是imDC。FK506能夠抑制DC表面CD80和CD86分子的上調(diào)。 2、45例大鼠頸部心臟移植模型，手術(shù)成功率80.0％。H檢驗(yàn)顯示，3組移植心臟存活時(shí)間的差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；q檢驗(yàn)顯示，3組間兩兩比較，1、2組，1、3組間差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(

4、P<0.01)，2、3組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。 3、供體大鼠脾細(xì)胞作為刺激細(xì)胞時(shí)，未經(jīng)FK506處理組大鼠MLR的SI值(3.48±0.84)，F(xiàn)K506處理組SI值(3.59±0.68)，均明顯低于對(duì)照組(6.83±0.47)，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，2、3組間SI值無明顯差異。第三品系Lewis大鼠脾細(xì)胞作為刺激細(xì)胞時(shí)，未經(jīng)FK506處理組SI值(6.57±0.51)，F(xiàn)K506處理組SI值(6.

5、67±0.66)，與對(duì)照組(6.58±1.03)之間無明顯差異(P>0.05)。 4、方差分析示各組大鼠血清IL-2、IFN-r、IL-4、IL-10濃度間差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。S-N-K檢驗(yàn)顯示，2、3組IL-2水平于第7天時(shí)無明顯差異，IFN-r水平于第14天時(shí)無明顯差異(P>0.05)；其余各組間差異均有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P(0.01)。第2、3組代表Th1的IL-2、IFN-r的水平明顯降低，而代表Th2的

6、IL-4、IL-10水平明顯增高。 5、對(duì)照組的移植心臟病理顯示心肌明顯充血、水腫，大量炎性細(xì)胞浸潤，心肌細(xì)胞明顯變性壞死；未經(jīng)FK506處理組的心肌淋巴細(xì)胞浸潤明顯減少，心肌細(xì)胞無明顯變性、壞死；FKS06處理組幾乎見不到炎性細(xì)胞浸潤以及心肌細(xì)胞變性和壞死。 結(jié)論：1、FKS06對(duì)DC的功能成熟有明顯的抑制作用。 2、imDC能夠誘導(dǎo)同種異體大鼠心臟移植免疫耐受；FK506處理的imDC能夠加強(qiáng)這種免疫耐受。