文蛤病毒病調(diào)查與體外細(xì)胞培養(yǎng)研究.pdf

1、文蛤(Meretrix meretrix Linnaeus)是江蘇海域重要的海產(chǎn)經(jīng)濟(jì)貝類，近年常有大規(guī)模異常死亡的現(xiàn)象發(fā)生，本課題對(duì)此進(jìn)行了初步研究。 對(duì)江蘇沿海異常死亡的文蛤樣品的超微結(jié)構(gòu)觀察中，發(fā)現(xiàn)了一種球形病毒顆粒，大小為45-55nm，核心區(qū)電子密度較高，未見明顯囊膜。該病毒幾乎可存在于所有組織中，細(xì)胞的損壞程度與該病毒的存在有密切關(guān)系。受感染細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)顯示核變形，染色質(zhì)變性凝集于核膜內(nèi)側(cè)，線粒體空泡，核糖體脫落，溶酶

2、體增多，高爾基體崩解，鰓和腸上皮細(xì)胞的微絨毛結(jié)構(gòu)脫落，肝細(xì)胞內(nèi)脂滴和糖原消失或彌散等。 以文蛤外套膜為材料，采用改良的M199培養(yǎng)基，在不同溫度和鹽平衡條件下進(jìn)行組織與細(xì)胞培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)果顯示，24h左右外套膜組織邊緣有細(xì)胞爬出，48h后開始形成單層新生細(xì)胞，并發(fā)展為生長(zhǎng)暈。7-10d細(xì)胞基本長(zhǎng)滿培養(yǎng)瓶底。細(xì)胞培養(yǎng)可持續(xù)30-35d。本文還描述了培養(yǎng)中出現(xiàn)的3種不同形態(tài)特征的細(xì)胞，并對(duì)37℃下培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)及分裂特征作了描述與討論