尿液sTim-3、Fractalkine、BCA-1對移植腎急性排異無創(chuàng)性診斷及預(yù)測價值的臨床研究.pdf

1、本研究分為三部分：
　　 第一部分：尿液可溶性T細(xì)胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3（sTim-3）對移植腎急性排異無創(chuàng)性診斷及預(yù)測的價值
　　 目的：通過回顧性檢測研究尿液可溶性T細(xì)胞免疫球蛋白粘蛋白分子-3（sTim-3）在腎移植患者發(fā)生急性排異時的變化，探討sTim-3在移植腎急性排異中的診斷價值，同時進(jìn)行前瞻性動態(tài)檢測腎移植術(shù)后早期移植患者尿液中sTim-3的變化，進(jìn)一步評估sTim-3在移植受者免疫狀態(tài)監(jiān)測中的作用。<

2、br>　　 方法：選擇2006.1-2009.10在本中心接受腎臟移植患者（有病理活檢并且保留有完整尿液標(biāo)本）中，術(shù)后1年內(nèi)血肌酐較基礎(chǔ)值升高25-30％以上且移植腎活檢病理診斷為急性排異49例，移植腎功能穩(wěn)定且術(shù)后1-2月程序活檢病理診斷為移植腎狀態(tài)（未見組織學(xué)損害，No-AR）58例，移植腎功能穩(wěn)定且術(shù)后1-2月程序活檢病理診斷為亞臨床排異10例，病理證實(shí)的急性腎小管壞死9例以及慢性移植腎腎病29例。同時留取健康對照者晨尿尿標(biāo)本4

3、0份。用ELISA的方法測定上述尿液sTim-3的水平（檢測結(jié)果均用尿肌酐值校正），比較術(shù)后不同時間、不同組別之間sTim-3水平的差異，并用免疫組化的方法研究急性排異者、移植腎狀態(tài)者Tim-3表達(dá)的差異。
　　 結(jié)果：49例急性排異患者尿液sTim-3的水平（4257±439.4,95％CI:3373-5142ng/mmol creatine）明顯高于腎功能穩(wěn)定患者（1433±107.2，95％CI:1218-1648ng/m

4、mol creatine）和健康對照組患者（1269±99.3，95％CI:1068-1469 ng/mmolcreatine)，構(gòu)建診斷急性排異的ROC曲線，曲線下面積0.874(95％CI:0.8-0.948，P<0.001)，結(jié)合特異性和敏感性最適組合，當(dāng)sTim-3=1836 ng/mmol creatinine，診斷急性排異的敏感性和特異性分別達(dá)到89.4％和82.5％，P<0.001。急性排異患者sTim-3的水平與急性腎小

5、管壞死患者(2180±217,95％CI:1679-2680 ng/mmolcreatine)相比也有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P=0.02)。在術(shù)后早期的動態(tài)觀察中我們發(fā)現(xiàn)，急性排異組sTim-3術(shù)后一周內(nèi)平均水平都在6000 ng/mmol creatinine左右，而腎功能穩(wěn)定組患者的sTim-3水平在術(shù)后逐漸下降，到了術(shù)后第五天左右就達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)約2000 ng/mmol creatinine左右。同時我們也發(fā)現(xiàn)急性排異患者腎組織中Tim-3

6、表達(dá)增多，正常腎移植患者基本沒有發(fā)現(xiàn)Tim-3蛋白的表達(dá)。
　　 結(jié)論：作為無創(chuàng)性檢查的手段，首次發(fā)現(xiàn)尿液sTim-3在診斷急性排異，鑒別是否為耐激素排異和亞臨床排異方面有較好的敏感度和特異度，該蛋白分子可能是監(jiān)測移植腎免疫狀態(tài)的新方法。
　　 第二部分：尿液Fractalkine對移植腎急性排異無創(chuàng)性診斷及預(yù)測的價值
　　 目的：通過回顧性檢測研究尿液Fractalkine在腎移植患者發(fā)生急性排異時的變化，探討

7、Fractalkine在移植腎急性排異中的診斷價值，同時進(jìn)行前瞻性動態(tài)檢測腎移植術(shù)后早期移植患者尿液中Fractalkine的變化，進(jìn)一步評估Fractalkine在移植受者免疫狀態(tài)監(jiān)測中的作用。
　　 方法：選擇2006.1-2009.10在本中心接受腎臟移植患者（有病理活檢并且保留有完整尿液標(biāo)本）中，術(shù)后1年內(nèi)血肌酐較基礎(chǔ)值升高25-30％以上且移植腎活檢病理診斷為急性排異49例，移植腎功能穩(wěn)定且術(shù)后1-2月程序活檢病理診斷

8、為移植腎狀態(tài)（未見組織學(xué)損害，No-AR）58例，移植腎功能穩(wěn)定且術(shù)后1-2月程序活檢病理診斷為亞臨床排異10例，病理證實(shí)的急性腎小管壞死9例以及慢性移植腎腎病29例。同時留取健康對照者晨尿尿標(biāo)本40份。用ELISA的方法測定上述尿液Fractalkine的水平（檢測結(jié)果均用尿肌酐值校正），比較術(shù)后不同時間、不同組別之間Fractalkine水平的差異，并用免疫組化的方法研究急性排異者、移植腎狀態(tài)者Fractalkine表達(dá)的差異。

9、r>　　 結(jié)果：49例急性排異患者尿液Fractalkine的水平（429.1±56.1,95％CI:316.2-541.9 ng/mmol creatine）明顯高于腎功能穩(wěn)定患者（94.6±8.4,95％CI:77.9-111.3 ng/mmol creatine）和健康對照組患者(84.5±8.9,95％CI:66.5-102.6 ng/mmol creatine)，構(gòu)建診斷急性排異的ROC曲線，曲線下面積0.909(95％CI

10、:0.856-0.962，P<0.001)，結(jié)合特異性和敏感性最適組合，當(dāng)Fractalkine=144.6 ng/mmolcreatinine，診斷急性排異的敏感性和特異性分別達(dá)到84％和81％，P<0.001。急性排異患者Fractalkine的水平與急性腎小管壞死患者（133±9.8，95％CI:110.3-155.7ng/mmol creatine）(P<0.0001)。在術(shù)后早期的動態(tài)觀察中我們發(fā)現(xiàn)，急性排異組Fractalk

11、ine術(shù)后三周內(nèi)平均水平都維持在較高水平約400-600 ng/mmol creatinine左右，明顯高于腎功能穩(wěn)定組患者的Fractalkine水平（100-150 ng/mmol creatinine左右）。同時我們也發(fā)現(xiàn)急性排異患者腎組織中Fractalkine表達(dá)增多，可見多個小管的胞膜、管腔膜以及管周血管內(nèi)皮細(xì)胞染成棕黃色，正常腎移植患者偶見Fractalkine表達(dá)。
　　 結(jié)論：作為無創(chuàng)性檢查的手段，發(fā)現(xiàn)尿液Fr

12、actalkine在診斷急性排異中有較好的敏感度和特異度，并且能較早預(yù)測移植腎急性排異的發(fā)生。同時發(fā)生急性排異時，F(xiàn)ractalkine在腎小管上皮細(xì)胞和管周血管內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)明顯增強(qiáng)。
　　 第三部分：尿液B細(xì)胞趨化因-1(BCA-1)對移植腎急性排異診斷及排異類型鑒別的價值
　　 目的：通過回顧性檢測研究尿液BCA-1在腎移植患者發(fā)生急性排異時的變化，探討B(tài)CA-1在移植腎急性排異及排異類型中的診斷價值，同時進(jìn)行前

13、瞻性動態(tài)檢測腎移植術(shù)后早期移植患者尿液中BCA-1的變化，進(jìn)一步評估BCA-1在移植受者免疫狀態(tài)監(jiān)測中的作用。
　　 方法：選擇2006.1-2009.10在本中心接受腎臟移植患者（有病理穿刺并且保留有完整尿液標(biāo)本）中，術(shù)后1年內(nèi)血肌酐較基礎(chǔ)值升高25-30％以上且移植腎活檢病理診斷為急性排異49例，移植腎功能穩(wěn)定且術(shù)后1-2月程序活檢病理診斷為移植腎狀態(tài)（未見組織學(xué)損害，No-AR）58例，以及慢性移植腎腎病29例。同時留取健

14、康對照者晨尿尿標(biāo)本40份。用ELISA的方法測定上述尿液BCA-1的水平（尿標(biāo)本的數(shù)據(jù)均用尿肌酐值校正），比較術(shù)后不同時間、不同組別之間BCA-1水平的差異。
　　 結(jié)果：49例急性排異患者尿液BCA-1的水平（8.1±2.1,95％CI:3.9-12.4 pg/μmolcreatine）明顯高于腎功能穩(wěn)定患者（0.65±0.3,95％CI:0.044-1.26 pg/μmol creatine）和慢性移植腎腎病組患者（2.2±

15、0.8,95％CI:0.69-3.78 pg/μmol creatine），健康對照組患者幾乎都低于檢測低限。構(gòu)建診斷急性排異的ROC曲線，曲線下面積0.881（95％CI:0.811-0.951），結(jié)合特異性和敏感性最適組合，當(dāng)BCA-1=0.23 pg/μmolcreatinine，診斷急性排異的敏感性和特異性分別達(dá)到81.6％和887.9％。我們還發(fā)現(xiàn)急性體液性排異患者的BCA-1的水平（24.2±6.7 pg/μmol crea

16、tinine）顯著高于急性細(xì)胞性排異患者的水平（2.9±0.6 pg/μmol creatinine），P=0.009。構(gòu)建診斷急性體液性排異的ROC曲線，曲線下面積0.867(95％CI:0.725-1.005)，結(jié)合特異性和敏感性最適組合，當(dāng)BCA-1=8.3 pg/μtmol creatinine，診斷急性體液性排異的敏感性和特異性分別達(dá)到75％和91.9％。在術(shù)后早期的動態(tài)觀察中我們發(fā)現(xiàn)，急性排異組BCA-1術(shù)后3周內(nèi)平均水平都