版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、Src羧基末端激酶結(jié)合蛋白(csk-binding protein,CBP)是2000年發(fā)現(xiàn)報道的新基因,目前認(rèn)為CBP通過對Src家族成員激酶活性的負(fù)反饋調(diào)節(jié)以及對免疫細(xì)胞激活過程的負(fù)調(diào)節(jié)和腫瘤的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)聯(lián)。CBP的發(fā)現(xiàn),為Src激酶家族在細(xì)胞中的正確定位提供了良好的解釋,為腫瘤的分子機理研究提供了新的思路。目前關(guān)于CBP基因與人類肺癌發(fā)生、發(fā)展關(guān)系的研究國內(nèi)外尚未見報道。 目的: 比較分析CBP基因mRNA和蛋
2、白在人肺癌組織中的表達情況,通過基因重組技術(shù)構(gòu)建CBP基因真核表達載體,將其轉(zhuǎn)染人肺腺癌細(xì)胞株SPC-A-1,觀察重組表達載體對SPC-A-1細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。探尋CBP基因在肺腺癌SPC-A-1發(fā)生、發(fā)展中的作用,從而為肺腺癌機理研究和基因治療方面提供新的思路和理論依據(jù)。 方法: (1).RT-PCR及Western-blot方法檢測肺癌組織與對應(yīng)癌旁正常肺組織中CBP基因mRNA和蛋白的表達量,并探尋表達差異與臨
3、床病理的相關(guān)性。 (2).提取SPC-A-1細(xì)胞總RNA,根據(jù)人CBP基因序列設(shè)計引物,應(yīng)用RT-PCR法擴增目的片斷,通過雙酶切定向克隆的方法構(gòu)建CBP基因真核表達載體pcDNA3.0-CBP。 (3).應(yīng)用脂質(zhì)體(Lipofectamine2000)將重組表達載體導(dǎo)入SPC-A-1細(xì)胞,G418篩選陽性克隆,PCR鑒定轉(zhuǎn)染結(jié)果。應(yīng)用RT-PCR及Western-blot法檢測轉(zhuǎn)染前后細(xì)胞CBP基因mRNA和蛋白表達差
4、異。 (4).通過MTT比色、軟瓊脂集落形成、劃痕修復(fù)、Transwell細(xì)胞運動和Transwell細(xì)胞侵襲等一系列細(xì)胞功能學(xué)實驗,觀察穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株CBP的差異表達對腫瘤細(xì)胞增殖、粘附、運動和侵襲的影響。 結(jié)論: (1).與癌旁正常腫組織相比,人肺癌組織中CBP基因低表達。 (2).成功構(gòu)建了CBP基因的真核表達載體。 (3).應(yīng)用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法成功將CBP基因的真核表達載體導(dǎo)入SPC-A-1細(xì)
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 熊果酸對人肺腺癌SPC-A-1細(xì)胞的抑制作用及其機制研究.pdf
- 冬凌草甲素對人肺腺癌SPC-A-1細(xì)胞的抑制作用及其機制研究.pdf
- LITAF基因?qū)θ朔伟〢549細(xì)胞體外抑制作用.pdf
- 刺參酸性粘多糖對Hela細(xì)胞體外生長抑制作用研究.pdf
- 雙氟胞苷對兔晶狀體上皮細(xì)胞體外生長的抑制作用
- 曲妥珠單抗-納米金探針制備及對乳腺癌細(xì)胞體外生長抑制作用.pdf
- DNT細(xì)胞對胰腺癌體內(nèi)、外生長的抑制作用及其機制的實驗研究.pdf
- RASSF1A基因轉(zhuǎn)染對人肺腺癌細(xì)胞A549生長抑制作用及其相關(guān)機制的初步研究.pdf
- 藏紅花素對人肺腺癌SPC--A1細(xì)胞的增殖抑制作用及機制研究.pdf
- 抑癌基因TSLC1在胰腺癌中的表達及其對PANC-1細(xì)胞的生長抑制作用.pdf
- 化學(xué)小分子對人肺腺癌A549細(xì)胞的生長抑制作用研究.pdf
- 地塞米松對順鉑引起的人肺腺癌細(xì)胞SPC-A1凋亡的抑制作用及其分子機制的初步探討.pdf
- DPC4-Smad4基因轉(zhuǎn)染對胰腺癌細(xì)胞的抑制作用.pdf
- 姐妹染色單體分離相關(guān)基因在腫瘤細(xì)胞A549、SPC-A-1中的表達.pdf
- 肌醇六磷酸的幾種次級磷酸化形式對HT-29細(xì)胞體外生長的抑制作用.pdf
- 5氟尿嘧啶對肺腺癌a549細(xì)胞生長抑制作用機制的研究
- ADAM23基因?qū)Ψ蜗侔┘?xì)胞SPC-A-1浸潤和轉(zhuǎn)移的影響及其機制的研究.pdf
- RGD修飾的腺病毒介導(dǎo)ING4或-和P53基因表達對人肺腺癌細(xì)胞的體內(nèi)外生長抑制作用.pdf
- FHIT基因?qū)Ω伟┘?xì)胞生長的抑制作用及其機理的研究.pdf
- 鹽霉素對前列腺癌PC-3細(xì)胞及其干細(xì)胞體外抑制作用機制研究.pdf
評論
0/150
提交評論