hB7-1、Sart3雙基因修飾的腫瘤疫苗及其誘導的CTLs對骨肉瘤細胞的殺傷效應.pdf

1、華中科技大學博士學位論文hB71、Sart3雙基因修飾的腫瘤疫苗及其誘導的CTLs對骨肉瘤細胞的殺傷效應姓名：黃方敏申請學位級別：博士專業(yè)：外科學（骨外）指導教師：鄭啟新20040401華中科技大學同濟醫(yī)學院2001級博士學位論文體hB71Sart3／pEGFPNI。為下一步研究將SART3蛋白作為腫瘤疫苗應用于骨肉瘤的生物治療打下基礎?！娟P鍵詞】抗原；Sart3基因；B7基因：RT—PCR；克隆第二部分：真核表達載體hB71Sart3

2、tpEGFPN1的表達【摘要】目的觀察重組質粒載體hB71Sart3／pEGFPN1在真核細胞中的表達。方法將重組質粒載體hB7一lSart3／pEGFP—N1轉染人骨肉瘤細胞株MG一63，利用流式細胞儀和westernblot檢測hB71和Sart3基因的表達。結果流式細胞儀測定發(fā)現(xiàn)在轉染的人骨肉瘤細胞株表面有明顯的熒光增強，免疫印跡發(fā)現(xiàn)融合蛋白可以與抗B7抗體反應，融合蛋白分子量與B7一Sart3一EGFP的預測分子量相當。結論重組

3、質粒載體hB7—1Sart3／pEGFP—N1能夠在真核系統(tǒng)中表達B7—1分子和Sart3抗原蛋白?！娟P鍵詞】抗原；Sart3基因；B7基因；表達第三部分：hB71、Sart3基因介導的的骨肉瘤細胞的抗原提呈作用【摘要】目的探討B(tài)71、Sart3雙基因修飾的骨肉瘤細胞作為抗原提呈細胞，誘導抗腫瘤的細胞毒T淋巴細胞(CTL)反應的可能性。方法用含人B7一l、Sart3雙基因的重組真核表達載體修飾骨肉瘤細胞MG63，體外刺激異體淋巴細胞，誘

4、導細胞毒T淋巴細胞反應。結果成功地誘導了細胞毒T淋巴細胞反應，獲得的CTL在體外對骨肉瘤細胞有顯著的細胞毒活性，其培養(yǎng)上清中IFN—Y分泌水平增高。結論經(jīng)B7—1、Sart3雙基因修飾的骨肉瘤細胞，可以作為有效的抗原提呈細胞，誘導抗骨肉瘤的細胞毒T淋巴細胞反應?！娟P鍵詞】抗原提呈細胞；Sart3基因：B7基因；細胞毒T淋巴細胞第四部分：基因修飾的腫瘤疫苗誘導的CTLs對耐藥腫瘤細胞的殺傷作用【摘要】目的探討hB7—1、Sart3雙基因修