衣原體噬菌體phiCPG1衣殼蛋白Vp1單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用.pdf

1、天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文衣原體噬菌體phiCPG1衣殼蛋白Vp1單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用姓名：侯淑萍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：病原生物學(xué)指導(dǎo)教師：劉全忠20090501天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文經(jīng)三次基礎(chǔ)免疫后小鼠血清中的抗體效價(jià)可達(dá)到1：6400。融合后一周左右，雜交瘤細(xì)胞可生長(zhǎng)至1／3～1／2孔，取上清液測(cè)抗體分泌情況，篩選出3個(gè)陽(yáng)性孔。將陽(yáng)性孔擴(kuò)大培養(yǎng)后進(jìn)行三次亞克隆化，獲得單克隆，擴(kuò)大培養(yǎng)后進(jìn)行雜交瘤細(xì)胞及單克隆抗體的鑒定。雜交瘤

2、細(xì)胞染色體分析發(fā)現(xiàn)染色體數(shù)目平均為98。結(jié)構(gòu)上多數(shù)為端著絲點(diǎn)染色體，還有少數(shù)亞中部著絲點(diǎn)染色體。3株細(xì)胞分泌的單克隆抗體的免疫球蛋白類別均為IgGl。動(dòng)物體內(nèi)誘生的腹水中抗體經(jīng)純化后效價(jià)大于1：102400。利用得到的單克隆抗體檢測(cè)了20份臨床標(biāo)本，結(jié)果均為陰性。綜上所述，本研究成功獲得了衣原體噬菌體PhiCPGl的衣殼蛋白Vpl的純品，制備了抗衣原體噬菌體衣殼蛋白Vpl的單克隆抗體，采用免疫熒光法將其用于臨床沙眼衣原體噬菌體的篩查，尚