2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
  為胃癌治療尋求一種靶向腫瘤血管的載藥系統(tǒng),以期提高藥物的選擇特異性,增強藥物的治療效果。本項目擬將既有靶向作用又有抑癌作用的靶向肽GX1,通過后插入法連接到載PTEN抑癌基因的腺病毒-陰離子脂質(zhì)體(AL-Ad5)表面,考察其對胃腺癌細胞SGC-7901和共培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞co-HUVEC的增殖抑制作用,對胃腺癌細胞SGC-7901的遷移抑制作用以及胃腺癌細胞SGC-7901對該擬構(gòu)建載藥系統(tǒng)GX1-AL-Ad5的攝

2、取情況,為進一步證明它能在體內(nèi)有效的抑制胃癌血管內(nèi)皮細胞的增殖和遷移做基礎(chǔ)工作。
  方法:
  1、對已導(dǎo)入抑癌基因PTEN的重組腺病毒進行擴增、純化和滴度測定。
  2、通過簡單的化學(xué)方法將GX1與PEG2000偶聯(lián),并且通過SDS-PAGE電泳和熒光強度的檢測確認其是否偶聯(lián)成功。
  3、合成膽固醇琥珀酸單酯以制備陰離子脂質(zhì)體。
  4、通過鈣離子融合法制備腺病毒-陰離子脂質(zhì)體(Ad5-AL);通過后

3、插入法將雙功能多肽GX1連接到腺病毒-陰離子脂質(zhì)體(Ad5-AL)表面,制備靶向載藥系統(tǒng)(GX1-AL-Ad5),并測定該復(fù)合物的粒徑及Zeta電位。
  5、采用MTT法考察GX1-AL-Ad5對胃腺癌細胞SGC-7901的增殖抑制作用;采用Transwell實驗考察GX1-AL-Ad5對胃腺癌細胞SGC-7901的遷移抑制作用;采用激光共聚焦顯微鏡檢測胃腺癌細胞SGC-7901對GX1的攝取能力。
  結(jié)果:
  

4、1、擴增、純化后的腺病毒滴度為2.21×109pfu/mL。
  2、SDS-PAGE電泳檢測結(jié)果顯示GX1-PEG2000條帶位置略低于10kd,PEG2000條帶呈彌散分布于2-5kd處。通過熒光強度檢測計算GX1-PEG2000平均連接率為75%。
  3、光譜檢測顯示成功合成膽固醇琥珀酸單酯,以用于制備陰離子脂質(zhì)體。
  4、成功制備GX1介導(dǎo)的腺病毒-陰離子脂質(zhì)體復(fù)合物(GX1-AL-Ad5),并測得其粒徑和

5、Zeta電位均在較優(yōu)范圍內(nèi)。
  5、GX1-AL-Ad5靶向給藥系統(tǒng)對SGC-7901細胞和co-HUVEC細胞的平均增殖抑制率分別是68.36%和64.13%,均高于單獨使用GX1-AL或Ad5-AL的平均增殖抑制率;GX1-AL-Ad5對胃腺癌細胞SGC-7901的遷移抑制作用明顯高于GX1-AL和Ad5-AL;激光共聚焦的結(jié)果顯示胃腺癌細胞SGC-7901對連接有GX1的載藥系統(tǒng)攝取效果明顯更好。
  結(jié)論:

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