PCR-RFLP技術快速檢測和鑒定血液中念珠菌的實驗性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、山西醫(yī)科大學碩士學位論文PCRRFLP技術快速檢測和鑒定血液中念珠菌的實驗性研究姓名：劉穎慧申請學位級別：碩士專業(yè)：皮膚病與性病學指導教師：甄莉20080325山西醫(yī)科大學碩士學位論文StudyontheidentificationofCandidaSpeciesinthebloodbyPCR—RFLPassayAbstractobjective：ToestablishrapidmethodstodetectandidentifyCan

2、didaisolatesinthebloodsamplesbyusingPCRRFLPMethods：BiospinFungusGenomicDNAExtractionKit(hereinaftertobereferredasBiospin)wasusedtoisolatedDNAfrom50sampleswhichweretheCandidaspeciesinthebloodpreparationandcompared、析thconv

3、entionalphenol—chloroformextractionmethod20sampleswhichweretheCandidaspeciesinthebloodpreparationweredetectedandidentifiedbyRFLPassayandcomparedwithconventionalculturemethodFurthermoredetectRFLPassay’Ssensitivitystabilit

4、yaswellasspecificityResults：lCandidaalbicans，Candidaparapsilosis，Candidakruseicanbeamplifiedbytheuniversalprimerpair，theproductswereabout520bp2ThedetectionlimitofCandidaalbicansinsimulatedbloodsample、ⅣimuniversalprimerPC

5、RWas10CFU／m13AfteramplificationfromCandidaalbicans，Candidaparapsilosis，Candidakrusei，andtheproductsweredigestedwithMspI，productingthreeuniquebandpatterns，respectively4BiospinFungusGenomicDNAExtractionKit，whichwasusedtois

6、olatedDNAfromCandidaspeciesisbetterthanconventionalphenolchloroformextractionmethod(f=7259P001)5PCR—RFLPwereassaydetectedandidentifiedCandidaspeciesinthebloodpreparationisbetterthanconventionalculturemethod(p005)andbotho

7、fthemhavebetteragreement(K=0694p001)Conclusions：PCR—RFLPassayisarapid，sensitiveandspecificmethodtodetectCandidaisolateswhichiscomparedwimconventionalculturemethodKeywords：Candidaisolates，PolymeraseChainReaction，restricti

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