TNF-α對早孕滋養(yǎng)細(xì)胞激素分泌及胰島素信號蛋白的影響.pdf

1、目的：用不同濃度的人重組TNF-a刺激早孕滋養(yǎng)細(xì)胞，檢測其培養(yǎng)基中糖、P、E<,2>、B-HCG值得的變化：TNF-a對早孕滋養(yǎng)細(xì)胞增殖的影響；滋養(yǎng)細(xì)胞中胰島素信號蛋白的表達(dá)；及 TNF-a對滋養(yǎng)細(xì)胞中GLUT1、IRS-1蛋白的影響。 方法：用孕 6-10周做人工流產(chǎn)患者的胎盤組織培養(yǎng)滋養(yǎng)細(xì)胞。免疫組化鑒定細(xì)胞純度；根據(jù)妊娠期糖尿病患者外周血清中TNF-a的濃度設(shè)的梯度 20pg/ml、200pg/ml、2000pg/ml、2

2、0000pg/ml刺激滋養(yǎng)細(xì)胞，檢測培養(yǎng)液中含糖量、E<,2>、P、B-HCG的含量；用MTT檢測不同濃度TNF-a對滋養(yǎng)細(xì)胞增殖的影響；SDS丙烯酰電泳蛋白印記檢測葡GLUT1和IRS-1的差異；加胰島素刺激后，檢測濃度是20000pg/ml TNF-a刺激滋養(yǎng)細(xì)胞吸收糖的情況。 結(jié)果：1．培養(yǎng)純度較高早孕滋養(yǎng)細(xì)胞；2．滋養(yǎng)細(xì)胞存在GLUT1、IRS-1、ERK、 GLUT4的表達(dá)；3．TNF-a組與空白、組比血糖無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異

3、；在胰島素刺激下20000pg/ml的TNF-a有促進(jìn)滋養(yǎng)細(xì)胞吸收糖的趨勢；4．TNF-a對滋養(yǎng)細(xì)胞分泌的B-HCG、P無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；與空白組比200pg/ml，2000pg/ml20000pg/ml對E<,2>的影響有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)，E2的分泌量呈下降趨勢；5．不同濃度TNF-a對早孕期滋養(yǎng)細(xì)胞的增殖TNF-α組與空白組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.05)；TNF-a組間比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；6．TNF-a完全阻斷滋養(yǎng)細(xì)胞胰島素信號

4、蛋白IRS-1表達(dá)；對GLUT1蛋白表達(dá)無明顯差異。 結(jié)論：1．滋養(yǎng)細(xì)胞存在GLUT1、IRS-1、ERK、 GLUT4的表達(dá)；2．TNF-a對滋養(yǎng)細(xì)胞增殖有影響； 3．TNF-a對滋養(yǎng)細(xì)胞分泌的P無統(tǒng)計(jì)差異，但P值隨TNF-a濃度增加呈上升趨勢，TNF-a可能是通過增加滋養(yǎng)細(xì)胞分泌P促使IR的產(chǎn)生：4．20pg/ml、200pg/ml、2000pg/ml、20000pg/ml TNF-a不抑制滋養(yǎng)細(xì)胞吸收糖；加胰島素刺激后，2