家族性淀粉樣多發(fā)神經(jīng)病家系TTR Gly83Arg突變研究.pdf

1、目的:
　　1.分析貴州省家族性淀粉樣多發(fā)神經(jīng)病(familial amyloid polyneuropathyFAP)家系(編號GZ001)的臨床和遺傳特征。
　　2.研究GZ001家系淀粉樣變性與轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(transthyretinTTR)之間的關(guān)系,確定該家系TTR基因致病突變位點(diǎn)。
　　方法:
　　1.家系27名受檢者(12名患者,15名正常人)進(jìn)行眼科檢查,包括視力、眼壓、淚液分泌實(shí)驗(yàn)、裂隙燈檢查

2、、三面鏡和眼底鏡檢查。IV:4,IV:6和IV:8進(jìn)行了眼B超、超聲生物顯微鏡、肌電圖及釓增強(qiáng)心臟核磁檢查。
　　2.玻璃體切割手術(shù)中取IV:4和IV:6玻璃體標(biāo)本,進(jìn)行剛果紅染色及免疫組化檢查。
　　3.抽取家系27名受檢者外周靜脈血8ml,提取基因組DNA。采用聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)和Sanger測序法對TTR基因4個(gè)外顯子進(jìn)行突變位點(diǎn)篩查。發(fā)現(xiàn)突變位點(diǎn)后,在家系外10

3、0個(gè)無親緣關(guān)系的正常人中進(jìn)行驗(yàn)證。
　　結(jié)果:
　　1.該家系共5代85人,現(xiàn)存活患者13人,其中男7人,女6人。遺傳方式符合常染色體顯性遺傳。
　　2.12名受檢患者均罹患玻璃體混濁,其中4人伴發(fā)雙眼開角型青光眼。10名患者存在周圍神經(jīng)病變,1名患者出現(xiàn)心肌淀粉樣變性。
　　3.玻璃體標(biāo)本剛果紅染色陽性,在偏振光下呈蘋果綠色雙折光,證實(shí)玻璃體中存在淀粉體。TTR抗體免疫組化反應(yīng)呈陽性,確定玻璃體標(biāo)本中含有轉(zhuǎn)甲狀

4、腺素蛋白。
　　4.TTR基因外顯子測序,27名受檢者中12名患者和3名年齡在12-23歲之間的未發(fā)病者第三外顯子發(fā)生雜合點(diǎn)突變,c.307G>C,導(dǎo)致編碼的蛋白第83位氨基酸的密碼子由GGC變?yōu)镃GC,即甘氨酸(Gly)變?yōu)榫彼?Arg),Gly83Arg。100名正常對照者中未發(fā)現(xiàn)此突變。
　　結(jié)論:
　　1.GZ001家系為FAP家系,玻璃體混濁為首發(fā)癥狀,眼部病變和周圍感覺神經(jīng)病變?yōu)樵摷蚁抵饕R床特征。