CVB3編碼蛋白對大鼠心肌細胞H9C2部分炎癥相關因子表達影響的初步研究.pdf

1、病毒性心肌炎(VM)是由病毒引起的心肌局限性或彌漫性炎癥，嚴重者可致擴張型心肌病甚至猝死。其主要發(fā)病機制為心肌炎性、免疫反應和自身免疫反應。在與人類心肌炎相關的多種病毒中，柯薩奇病毒B3(CVB3)是公認的主要病因。對于CVB3導致病毒性心肌炎的致病機制已有很多研究?？偟膩碚f，是病毒感染與不同疾病階段的宿主免疫反應之間共同作用的結果。固有免疫和適應性免疫都在心肌損傷發(fā)生發(fā)展過程中起了重要的決定性要素，但具體病毒的那些因子是引起病毒性心肌

2、炎的關鍵因子，其具體細胞生物學和免疫學機制如何，尚有許多不清楚的地方。
　　本實驗首先根據CVB3保守序列設計引物，通過PCR擴增并克隆了一株心肌炎相關的CVB3基因組的蛋白編碼區(qū)域，經序列分析確認，該序列長6555nt，編碼一個2185a.a.的多聚蛋白。與已知的CVB3比較，核苷酸序列同源性和氨基酸序列同源性均高于99％。
　　隨后，利用擴增出的基因片段，分別構建了表達病毒5個成熟蛋白的表達質粒，并用于轉染大鼠心肌細胞H

3、9C2，分析了轉染細胞中相關細胞炎癥因子的表達情況。結果表明，在轉染細胞中絕大部分驗證因子的表達水平并未發(fā)生明顯上升，但在病毒感染和表達VP4、2B、3C等蛋白的轉染細胞中，TGF-β的表達有明顯上升。
　　本研究發(fā)現若干病毒蛋白的表達可以導致TGF-β表達的改變。近期的研究表明，TGF-β可能在心肌纖維化和炎癥反應中起重要作用，本研究的結果可以為進一步闡明了柯薩奇病毒B3型引發(fā)病毒性心肌炎的病理機制，為病毒性心肌炎治療以及創(chuàng)新藥