CVB3編碼蛋白對(duì)大鼠心肌細(xì)胞H9C2部分炎癥相關(guān)因子表達(dá)影響的初步研究.pdf

1、病毒性心肌炎(VM)是由病毒引起的心肌局限性或彌漫性炎癥，嚴(yán)重者可致擴(kuò)張型心肌病甚至猝死。其主要發(fā)病機(jī)制為心肌炎性、免疫反應(yīng)和自身免疫反應(yīng)。在與人類心肌炎相關(guān)的多種病毒中，柯薩奇病毒B3(CVB3)是公認(rèn)的主要病因。對(duì)于CVB3導(dǎo)致病毒性心肌炎的致病機(jī)制已有很多研究。總的來(lái)說(shuō)，是病毒感染與不同疾病階段的宿主免疫反應(yīng)之間共同作用的結(jié)果。固有免疫和適應(yīng)性免疫都在心肌損傷發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起了重要的決定性要素，但具體病毒的那些因子是引起病毒性心肌

2、炎的關(guān)鍵因子，其具體細(xì)胞生物學(xué)和免疫學(xué)機(jī)制如何，尚有許多不清楚的地方。
　　本實(shí)驗(yàn)首先根據(jù)CVB3保守序列設(shè)計(jì)引物，通過(guò)PCR擴(kuò)增并克隆了一株心肌炎相關(guān)的CVB3基因組的蛋白編碼區(qū)域，經(jīng)序列分析確認(rèn)，該序列長(zhǎng)6555nt，編碼一個(gè)2185a.a.的多聚蛋白。與已知的CVB3比較，核苷酸序列同源性和氨基酸序列同源性均高于99％。
　　隨后，利用擴(kuò)增出的基因片段，分別構(gòu)建了表達(dá)病毒5個(gè)成熟蛋白的表達(dá)質(zhì)粒，并用于轉(zhuǎn)染大鼠心肌細(xì)胞H

3、9C2，分析了轉(zhuǎn)染細(xì)胞中相關(guān)細(xì)胞炎癥因子的表達(dá)情況。結(jié)果表明，在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中絕大部分驗(yàn)證因子的表達(dá)水平并未發(fā)生明顯上升，但在病毒感染和表達(dá)VP4、2B、3C等蛋白的轉(zhuǎn)染細(xì)胞中，TGF-β的表達(dá)有明顯上升。
　　本研究發(fā)現(xiàn)若干病毒蛋白的表達(dá)可以導(dǎo)致TGF-β表達(dá)的改變。近期的研究表明，TGF-β可能在心肌纖維化和炎癥反應(yīng)中起重要作用，本研究的結(jié)果可以為進(jìn)一步闡明了柯薩奇病毒B3型引發(fā)病毒性心肌炎的病理機(jī)制，為病毒性心肌炎治療以及創(chuàng)新藥